犬瘟热病毒疫苗株H蛋白基因片段的克隆与表达及表达产物抗原性的初步鉴定

王好; 钱爱东; 刘晔; 扈荣良

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犬瘟热病毒疫苗株H蛋白基因片段的克隆与表达及表达产物抗原性的初步鉴定

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根据发表的犬瘟热病毒(CDV)参考株Ondetstepoort的序列设计一对引物,以CDV感染的Vero细胞总RNA为模板,经RT-PCR扩增得到549 bp DNA片段,将该片段以正确的阅读框架定向克隆于pGEX-4T-1中,然后将重组质粒转化宿主菌RosettaTM,在37℃、1.0 mmol/L WTG诱导下外源基因获得良好表达.经SDS-PAGE鉴定,表达的融合蛋白约46 ku,与预期值一致.Western blot试验显示,CDV免疫的小鼠血清可特异的识别该重组蛋白,表明该重组蛋白具有一定的免疫原性.

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来源
《中国预防兽医学报》 |2008年第8期|601-604611|共5页
作者
王好; 钱爱东; 刘晔; 扈荣良;
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作者单位

吉林农业大学,动物生产及产品质量安全教育部重点实验室,吉林,长春,130181;

军事医学科学院,军事兽医研究所,吉林,长春,130062;

吉林农业大学,动物生产及产品质量安全教育部重点实验室,吉林,长春,130181;

军事医学科学院,军事兽医研究所,吉林,长春,130062;

军事医学科学院,军事兽医研究所,吉林,长春,130062;

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正文语种 chi
中图分类 S852.659.5;
关键词
犬瘟热病毒; H基因; 克隆表达; Westernblot;

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