用荧光定量RT-PCR方法检测猪瘟病毒

史子学; 徐兴然; 涂长春

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用荧光定量RT-PCR方法检测猪瘟病毒

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为了建立能特异检测不同基因型猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV),同时又能区分其他瘟病毒的基因检测方法,本实验针对CSFV基因组5'端非编码区设计并合成了简并引物和TaqMan探针,在优化反应条件的基础上,成功地建立了特异检测CSFV的荧光定量RT-PCR检测方法.再以已知滴度的CSFV石门株血毒总RNA反转录产物建立标准品,该标准品可以用于定量临床样品中的CSFV滴度,所建立的荧光定量PCR方法可以灵敏地检测出10-0.82个TCID50病毒含量.最后用建立的方法对108份临床样品进行检测并同时进行病毒分离,荧光定量PCR方法检测出73份阳性样品且与病毒分离的符合率为100%,而常规RT-PCR只检测出54份阳性样品,表明本荧光定量RT-PCR法在检测猪瘟病料上具有潜在的应用价值.

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来源
《中国预防兽医学报》 |2007年第6期|467-470|共4页
作者
史子学; 徐兴然; 涂长春;
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作者单位

军事医学科学院,军事兽医研究所,吉林,长春,130062;

吉林大学,畜牧兽医学院,吉林,长春,130062;

军事医学科学院,军事兽医研究所,吉林,长春,130062;

军事医学科学院,军事兽医研究所,吉林,长春,130062;

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正文语种 chi
中图分类家畜病毒学;
关键词
猪瘟病毒; 荧光定量RT-PCR; 标准曲线; 病毒总RNA;

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