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猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF2基因的表达及其单克隆抗体的制备

         

摘要

将猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)CH-1a株的GP2蛋白基因进行截短修饰后,克隆于pGEX6p-1载体中,转化大肠杆菌,并进行诱导表达.经SDS-PAGE分析发现,融合表达的蛋白rtGP2大小约40 Ku,Westem b10t分析证实,表达的融合蛋白rtGP2能被PRRSV阳性血清所特异性识别.收获融合表达的rtGP2,免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,分别以表达的融合蛋白rtGP2和GST蛋白作为包被抗原,通过间接ELISA方法对融合细胞的上清液进行检测,结果获得了1株能稳定分泌抗rtGP2蛋白抗体的杂交瘤细胞株,将其命名为26D8,利用PRRSV感染的Marc-145细胞进行间接免疫荧光检测结果发现,所获得的单克隆抗体能与PRRSV感染细胞产生特异性免疫荧光.亚型鉴定结果显示,该单克隆抗体为IgG1型,其轻链均为κ链.本研究中融合表达的rtGP2蛋白及其单克隆抗体的获得,将为今后深入研究PRRSV GP2蛋白的功能与特性提供有益帮助.

著录项

  • 来源
    《中国预防兽医学报》 |2006年第6期|636-639644|共5页
  • 作者单位

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 家畜病毒学;
  • 关键词

    猪繁殖与呼吸综合征病毒; rtGP2; 单克隆抗体;

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