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副结核分枝杆菌MAP1068胞外蛋白酶的特性研究

         

摘要

为研究副结核分枝杆菌(MAP) 1068蛋白的特性,本研究以MAP参考株K10基因组为模板,PCR扩增其map1068基因,构建pET28a-map1068重组载体,将其转化BL21后诱导表达并纯化MAP1068蛋白.利用纯化的重组蛋白免疫(100 μg/只/0.1 rnL)小鼠制备多克隆抗体,应用该抗体对MAP1068蛋白进行亚细胞定位.以酪蛋白为底物测定MAP1068蛋白的酶活性.结果 显示,MAP1068蛋白以包涵体形式表达;经变性、复性、亲和层析纯化后获得目的蛋白;将该蛋白免疫小鼠后其血清抗体效价可达1∶204 800;该蛋白主要定位于MAP细胞壁,可降解酪蛋白,为胞外蛋白酶.本实验为进一步研究MAP的致病机制奠定了基础.

著录项

  • 来源
    《中国预防兽医学报》 |2019年第5期|505-508|共4页
  • 作者单位

    吉林农业大学动物科学技术学院;

    吉林长春130118;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室;

    黑龙江哈尔滨150069;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室;

    黑龙江哈尔滨150069;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室;

    黑龙江哈尔滨150069;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室;

    黑龙江哈尔滨150069;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室;

    黑龙江哈尔滨150069;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室;

    黑龙江哈尔滨150069;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室;

    黑龙江哈尔滨150069;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室;

    黑龙江哈尔滨150069;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室;

    黑龙江哈尔滨150069;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 病原细菌;
  • 关键词

    副结核分枝杆菌; MAP1068; 特性; 酶活性;

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