兔源性肺炎克雷伯氏菌PCR检测方法的建立

张自强; 孙雪岩; 徐靖怡; 牛冰玉; 王佳宁; 刘玉梅

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兔源性肺炎克雷伯氏菌PCR检测方法的建立

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摘要

试验拟通过建立兔源性肺炎克雷伯氏菌的PCR检测方法,为规模化兔场肺炎克雷伯氏菌的检测提供理论依据。以肺炎克雷伯氏菌的保守序列khe基因设计特异性引物,建立PCR反应体系,并对反应条件进行优化。选择不同菌株进行PCR扩增来检测该方法的特异性。接着对不同浓度的肺炎克雷伯氏菌DNA进行PCR扩增,以检测该方法的敏感性。对PCR反应体系和反应条件进行优化,结果显示当引物浓度为50μmol/L,退火温度为52℃时,特异性条带最亮。特异性试验结果显示只有肺炎克雷伯氏菌有特异性条带出现。敏感性试验结果显示建立的PCR检测方法能检测出的DNA最低浓度为1.83 ng/μL。研究所建立的PCR检测方法具有良好的敏感性和特异性,适合肺炎克雷伯氏菌的检测。

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来源
《中国养兔》 |2022年第6期|4-7|共4页
作者
张自强; 孙雪岩; 徐靖怡; 牛冰玉; 王佳宁; 刘玉梅;
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作者单位

河南科技大学动物科技学院;

洛阳471000;

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正文语种 chi
中图分类兔;
关键词
兔源; 肺炎克雷伯氏菌; PCR;

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