蜡样芽孢杆菌、产色葡萄球菌和肺炎克雷伯氏菌三重PCR检测方法建立与应用

胡慧; 李田美; 姜艳芬

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针对蜡样芽孢杆菌(B.cereus)的hblA基因、产色葡萄球菌(S.chromogenes)的sodA基因和肺炎克雷伯氏菌(K.pneumoniae)的khe基因,建立了三重PCR检测方法。结果显示,退火温度为54℃,BC-hblA、SC-sodA和KP-khe引物浓度分别为0.6、0.2、0.1μmol/L为最佳扩增条件;对B.cereus、S.chromogenes和K.pneumoniae的基因组DNA最低检测限分别为35.8、6.3、40.2 pg/μL,菌液最低检测限分别为9.9×10^(3)、1.1×10^(3)、1.0×10^(4)CFU/mL。特异性试验显示,除这3种菌以外,大肠埃希氏菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、链球菌、产气荚膜梭菌和腐败梭菌检测结果均为阴性。14份临床乳房炎乳样的检测结果显示,三重PCR方法B.cereus、S.chromogenes和K.pneumoniae的阳性率分别为35.7%(5/14)、14.3%(2/14)和7.1%(1/14),其中蜡样芽孢杆菌的PCR检测阳性率高于细菌分离鉴定阳性率(28.6%),细菌分离鉴定与PCR检测方法的阳性符合率为87.5%。结果表明,成功建立了能够同时检测蜡样芽孢杆菌、产色葡萄球菌和肺炎克雷伯氏菌的三重PCR方法,为引起乳房炎的病原菌的检测补充了新的方法,并为畜牧生产中这3种细菌的快速检测提供了有效方法。

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来源
《动物医学进展》 |2022年第7期|1-6|共6页
作者
胡慧; 李田美; 姜艳芬;
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作者单位

西北农林科技大学动物医学院;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类 S854.43;S857.26;
关键词
奶牛乳房炎; 蜡样芽孢杆菌; 产色葡萄球菌; 肺炎克雷伯氏菌; 三重PCR;

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