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circ0001955靶向miR-149对前列腺癌DU145细胞系放射敏感性的实验研究

         

摘要

目的探讨circ0001955对前列腺癌DU145细胞系放射敏感性的影响及分子机制。方法将si-con、si-circ0001955、miR-con、miR-149转染至DU145细胞中, 分别记为si-con、si-circ0001955、miR-con、miR-149组;将miR-149与pc-circ0001955共转染至DU145细胞记为miR-149+pc-circ0001955组, 以未经任何处理的细胞作为空白对照组。实时荧光定量PCR检测circ0001955和miR-149表达水平;MTT检测细胞活力;流式细胞仪检测细胞凋亡;Transwell检测细胞迁移和侵袭;蛋白质印迹法检测MMP-2、MMP-9、Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9、γ-H2AX蛋白表达;细胞克隆形成实验检测细胞放射敏感性;双荧光素酶报告实验验证circ0001955和miR-149的靶向关系。结果细胞中circ0001955高表达, miR-149低表达。沉默circ0001955或过表达miR-149后细胞活性、迁移和侵袭数降低, MMP-2、MMP-9表达水平降低, Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9表达水平升高, 细胞凋亡率升高(P&0.05)。4 Gy X线照射后细胞中γ-H2AX表达水平升高, 细胞存活分数降低, 敏感性比1.38。circ0001955靶向调控miR-149, 同时过表达circ0001955和miR-149后细胞增殖活性、迁移和侵袭细胞数升高, 细胞凋亡率、细胞存活分数升高, 敏感性比0.72。结论沉默circ0001955靶向上调miR-149抑制DU145细胞增殖、迁移、侵袭, 诱导细胞周期阻滞, 诱导细胞凋亡和增加细胞放射敏感性。

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