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circ_0001955靶向miR-149对前列腺癌DU145细胞系放射敏感性的实验研究

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目的 探讨circ_0001955对前列腺癌DU145细胞系放射敏感性的影响及分子机制.方法 将 si-con、si-circ_0001955、miR-con、miR-149转染至 DU 145细胞中,分别记为 si-con、si-circ_0001955、miR-con、miR-149组;将 miR-149与 pc-circ_0001955共转染至 DU145细胞记为 miR-149+pc-circ_0001955组,以未经任何处理的细胞作为空白对照组.实时荧光定量PCR检测circ_0001955和miR-149 表达水平;MTT检测细胞活力;流式细胞仪检测细胞凋亡;Transwell检测细胞迁移和侵袭;蛋白质印迹法检测 MMP-2、MMP-9、Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9、γ-H2AX 蛋白表达;细胞克隆形成实验检测细胞放射敏感性;双荧光素酶报告实验验证circ_0001955 和 miR-149的靶向关系.结果 细胞中circ_0001955高表达,miR-149低表达.沉默circ_0001955或过表达miR-149后细胞活性、迁移和侵袭数降低,MMP-2、MMP-9表达水平降低,Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9表达水平升高,细胞凋亡率升高(P＜0.05).4 Gy X线照射后细胞中γ-H2AX表达水平升高,细胞存活分数降低,敏感性比1.38.circ_0001955靶向调控miR-149,同时过表达circ_0001955和miR-149后细胞增殖活性、迁移和侵袭细胞数升高,细胞凋亡率、细胞存活分数升高,敏感性比0.72.结论 沉默circ 0001955靶向上调miR-149抑制DU145细胞增殖、迁移、侵袭,诱导细胞周期阻滞,诱导细胞凋亡和增加细胞放射敏感性.

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