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miR-101对宫颈癌HeLa细胞辐射敏感性的影响和机制研究

         

摘要

目的研究microRNA101(miR-101)对体外培养的人宫颈癌HeLa细胞辐射敏感性的影响及其作用机制。方法实验设为3组,分别为空白对照组、阴性对照组和实验组。采用160 k Vp X射线照射细胞,吸收剂量率为1.15 Gy/min。实时定量PCR(qRT-PCR)法检测miR-101的过表达情况;克隆形成实验检测miR-101对HeLa细胞辐射敏感性的影响;γ-H2AX免疫荧光法检测细胞DNA双链断裂,Western blot实验观察ATM和DNA-PKcs蛋白表达量变化。结果转染48 h后,实验组的细胞与空白对照组相比,miR-101的表达量明显增加(t=14.16,P<0.05)。过表达miR-101的HeLa细胞存活率明显降低(t=10.75,P<0.05)。miR-101能增加HeLa细胞的辐射敏感性(F=7.72,P<0.05),辐射增敏比为1.29。γ-H2AX免疫荧光显示,miR-101能抑制辐照后细胞DNA损伤修复。过表达miR-101的HeLa细胞与对照组相比,ATM和DNA-PKcs蛋白表达量明显减少。结论miR-101 mimic对HeLa细胞的生长有抑制作用。miR-101过表达能增加HeLa细胞的辐射敏感性,miR-101通过抑制辐照后DNA损伤修复提高辐射敏感性。

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