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CD44+/CD24+宫颈癌细胞对X射线照射诱导凋亡的抗拒性

         

摘要

目的探讨CD44+/CD24+宫颈癌细胞的放射抗拒性机制。方法体外培养人宫颈鳞癌(Siha)细胞,6 MV X射线给予8、16、30 Gy照射,流式细胞仪分选出CD44+/CD24+细胞。采用克隆形成实验拟合细胞存活曲线,比较细胞的放射敏感性;Hochest 33258荧光染色和透射电镜观察细胞形态变化;流式细胞术(FCM)分析细胞凋亡率;凝胶电泳观察凋亡细胞的DNA条带;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测细胞凋亡相关基因mRNA的表达。结果随着剂量的增加,CD44+/CD24+宫颈癌细胞比例逐渐增加;CD44+/CD24+细胞放射敏感性下降(t=93.99~400.45,P<0.05);CD44+/CD24+细胞中bcl-2、survivin、Oct4基因表达水平较亲代Siha细胞升高(t=221.35、941.65、82.27,P<0.01);Hochest 33258、透射电镜、DNA片段凝胶电泳及流式细胞定量研究显示,Siha细胞出现明显细胞凋亡改变,而Siha CD44+/CD24+细胞则未出现。结论 CD44+/CD24+宫颈癌细胞抵抗放疗的机制是抗拒射线诱导的细胞凋亡。

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