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辐射诱发细胞凋亡4种定量检测方法的比较

摘要

目的通过检测结果的比较和原理分析,提示4种凋亡检测方法鉴别凋亡和坏死的能力及优缺点.方法采用PI染色-流式细胞测量(P-F)法、TUNEL标记-流式细胞测量(T-F)法、Annexin V-FITC/PI活染-流式细胞测量(A-F)法和Hoechst/PI活染-荧光显微镜观察(H-O)法对γ射线诱发的人乳腺癌MCF-7细胞凋亡和坏死进行检测,以羟基喜树碱和叠氮钠分别为诱发凋亡和坏死的阳性对照物.结果4种方法对γ射线、羟基喜树碱诱发的细胞凋亡显示良好的时间-剂量依赖性响应.P-F法所得凋亡率较低,曲线斜率最小;T-F法反之;A-F法和H-O法可获得凋亡和坏死两套数据,且两种方法的数值相近.A-F法和H-O法可识别叠氮钠所致的细胞坏死;而P-F法和T-F法不能反映其致坏死为主的真实情况.结论P-F法和T-F法不能区别凋亡和坏死,A-F法和H-O法可以区别.P-F法较T-F法灵敏度低但简便经济.A-F法快速可靠,H-O法经济实用并可同时观察细胞形态学变化.

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