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羟基脲诱导神经管畸形小鼠模型及与其他小鼠模型的比较研究

         
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摘要

目的 本研究拟通过干扰新的叶酸相关代谢-核苷三磷酸还原成相应的脱氧核苷三磷酸通路中的关键酶-核苷酸还原酶,诱导构建神经管畸形(NTDs)小鼠模型,并且与前期构建的NTDs小鼠模型进行比较.方法 实验小鼠选用C57BL/6J小鼠,购自北京华阜康公司,雌鼠60只,雄鼠30只,小鼠年龄7～8周,体重18～20 g,常规饲养于SPF级动物房.小鼠饲养一周后,晚上18:00按照雄雌(1:2)进行合拢,早上分笼将有阴栓的小鼠标记为孕0.5 d(E 0.5).按照随机分组的方法将小鼠分为6组.其中实验组5组,在神经管闭合前的孕7.5 d(E 7.5),给予5种剂量的羟基脲进行腹腔注射;正常对照组,采用0.9％的氯化钠水溶液注射.采用不同剂量的羟基脲(HU)腹腔注射C57BL/6J孕鼠,诱导构建最佳小鼠NTDs模型,筛选出HU的最佳造模剂量为NTDs组.利用Western blot方法和免疫组化方法观察神经上皮细胞增殖和凋亡的情况,与前期诱导的NTDs小鼠模型中的结果进行对比.结果 HU可诱导出NTDs的小鼠模型,免疫组化检测结果显示,畸形胚胎中的PCNA的阳性细胞低于正常胚胎组;Caspase3的阳性细胞高于正常组(P<0.05).PCNA蛋白在NTDs组中的表达水平明显低于正常对照组(P<0.05),Cleaved Caspase-3蛋白在NTDs组中的表达水平明显高于正常对照组(P<0.05),并且与前期诱导模型的结果一致.结论 本研究通过干扰核苷酸还原酶,引起了神经管发育过程中细胞增殖和凋亡的失衡,从而诱导构建出NTDs小鼠模型,为进一步研究NTDs的机制提供了新的动物模型.

著录项

  • 来源
    《中国生育健康杂志》 |2021年第2期|137-142封4|共7页
  • 作者

    官臻; 王秀伟; 朱智强; 岳慧轩; 李莘; 秦佳星; 牛勃; 王建华;

  • 作者单位

    100020 北京 首都儿科研究所转化医学研究室;

    100020 北京 首都儿科研究所转化医学研究室;

    100020 北京 首都儿科研究所转化医学研究室;

    100020 北京 首都儿科研究所转化医学研究室;

    100020 北京 首都儿科研究所转化医学研究室;

    100020 北京 首都儿科研究所转化医学研究室;

    100020 北京 首都儿科研究所转化医学研究室;

    100020 北京 首都儿科研究所转化医学研究室;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类
  • 关键词

    羟基脲; 神经管畸形; 细胞增殖; 凋亡; 小鼠;

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