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HLA-B2704转基因小鼠模型的建立

         

摘要

目的 制备HLA B2 70 4转基因小鼠。方法 应用显微注射将HLA B2 70 4基因注入C5 7BL/6×昆明鼠和昆明鼠×昆明鼠F1代受精卵 ,出生动物及其后代经PCR初筛 ,采用斑点杂交和Southern杂交对阳性标本作进一步鉴定和整合基因拷贝数测定 ,阳性者行免疫组化染色和流式细胞术检测HLA B2 70 4蛋白表达水平。结果 10只仔鼠 (首建转基因鼠 ,founder)表达有HLA 2 70 4基因。由注射基因后移卵出生的 10 1只小鼠中 ,C5 7BL/6×昆明鼠杂种 3 7只 ,阳性 7只 ( 18 9% ) ,昆明鼠×昆明鼠杂种 64只 ,阳性 3只 ( 4 7% ) ,阳性动物外周血淋巴细胞、皮肤和胃肠道上皮细胞内均有HLA B2 70 4蛋白表达。结论 应用C5 7BL/6和昆明鼠成功建立了HLA B2 70 4的转基因小鼠。与昆明鼠×昆明鼠F1代相比 ,C5 7BL/6×昆明鼠F1代更适合用于转基因动物制备。

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