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壳聚糖/pCDNA3.1(+)CrmA对软骨细胞基质金属蛋白酶1及其抑制因子表达的影响

         

摘要

目的探讨壳聚糖/pCDNA3.1(+)CrmA对IL-1β诱导的软骨细胞MMP-1及其特异性组织抑制因子(TIMP)-1 mRNA和蛋白表达的影响。方法体外培养兔关节软骨细胞,分别加入PBS、10μg/ml壳聚糖/pCDNA3.1(+)和壳聚糖/pCDNA3.1(+)CrmA处理后,加入10 ng/ml IL-1β共培养,采用实时定量RT-PCR方法检测各组软骨细胞MMP-1和TIMP-1 mRNA的表达,蛋白印迹法分析各组软骨细胞MMP-I和TIMP-1蛋白的表达。采用单因素方差分析进行统计学分析。结果壳聚糖/pCDNA3.1(+)CrmA处理组软骨细胞MMP-1 mRNA(0.44±0.04)的表达明显低于PBS组(1.00±0.05)和壳聚糖/pCDNA3.1(+)组(0.76±0.07),3组比较差异有统计学意义(F=106.93,P<0.01)。与PBS组(0.73±0.06)和壳聚糖/pCDNA3.1(+)组(0.46±0.05)比较,壳聚糖/pCDNA3.1(+)CrmA处理组(0.28±0.03)MMP-1蛋白的表达显著降低(F=59.66,P<0.01)。各组间TIMP-1 mRNA和蛋白的表达差异无统计学意义。结论壳聚糖/pCDNA3.1(+)CrmA能够明显抑制IL-1β诱导的软骨细胞MMP-1 mRNA和蛋白的表达,上调IL-1β诱导的软骨细胞TIMPs/MMPs的比值,这可能成为壳聚糖/pCDNA3.1(+)CrmA减轻OA软骨退变的原因之一。

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