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脱氢表雄酮对兔骨关节炎软骨ADAMTS/TIMP-3酶系统调节的实验研究

         
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目的观察关节腔内注射脱氢表雄酮（DHEA）对兔骨关节炎模型含血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶（ADAMTS）/金属蛋白酶组织抑制因子（TIMP）-3酶系统的影响,并探讨其作用机制。方法 60只新西兰大白兔行双侧前交叉韧带切除术,术后4周,根据随机化原则于每只兔一侧膝关节腔内注射100 mmol/L DHEA（实验组）,另一侧关节腔内注射相同剂量的二甲基亚砜（对照组）,每周1次,共注射8周。术后12周行膝关节X线检查后处死兔子,取膝关节行大体和组织病理学检查,取股骨内髁软骨组织行羟脯氨酸及糖胺聚糖含量测定,用反转录聚合酶链反应方法检测关节软骨中蛋白聚糖酶-1、蛋白聚糖酶-2、TIMP-3、转化生长因子（TGF）-β1、蛋白聚糖、Ⅱ型胶原的表达,用蛋白印迹法检测关节软骨中Ⅱ型胶原及蛋白聚糖裂解片段（Aggrecan ARGxx）的表达。采用两样本Mann-Whitney检验或t检验进行统计学分析。结果对照组股骨髁及胫骨平台软骨退变程度显著高于实验组（Z=-3.517,P＜0.01;Z=-2.518,P＜0.05）。实验组软骨病理学评分（5.3±1.2）显著低于对照组（10.1±1.3）,差异有统计学意义（P＜0.01）;实验组羟脯氨酸湿质量（5.7±0.3）μg/ml,干质量（23.6±1.7）μg/ml和糖胺聚糖[（30±4）μg/ml]含量显著高于对照组[湿质量（4.6±0.5）μg/ml,干质量（18.5±1.4）,糖胺聚糖（24±4）μg/ml],差异有统计学意义（P＜0.01）;实验组软骨ADAMTS-4（0.15±0.03）、ADAMTS-5（0.10±0.04）的mRNA表达显著低于对照组（0.29±0.08,0.15±0.05,P均＜0.05）;而TIMP-3（0.85±0.10）、TGF-β1（1.2±0.4）、蛋白聚糖（0.87±0.31）及Ⅱ型胶原（2.7±0.6）的mRNA表达显著高于对照组（0.70±0.13,0.8±0.4,0.49±0.16,2.2±0.5）,差异有统计学意义（P均＜0.05）;实验组蛋白聚糖ARGxx（0.53±0.10）的蛋白表达显著低于对照组（0.81±0.12）;Ⅱ型胶原（2.3±0.7）蛋白表达显著高于对照组（1.7±0.5）,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 DHEA对骨关节炎关节软骨具有保护作用,可延缓进展。DHEA还促进TGF-β1的表达,延缓软骨基质组分蛋白聚糖及Ⅱ型胶原的丢失,从而对抗骨关节炎软骨退变的进展。

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