膜突蛋白及其抗体对人肺微血管内皮细胞损伤机制的研究

李梦涛; 尹雷; 王迁; 郑文洁; 何建国; 曾小峰

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膜突蛋白及其抗体对人肺微血管内皮细胞损伤机制的研究

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目的通过抗膜突蛋白单克隆抗体（MmAb）介导人肺微血管内皮细胞（HPMEC）损伤模型,探讨膜突蛋白及其抗体在肺血管损伤和肺动脉高压（PAH）形成过程中的作用。方法以磷酸盐缓冲液（PBS）作为对照组,肿瘤坏死因子（TNF）-α、MmAb及TNF-α+MmAb作为实验组分别作用于HPMEC,在不同时相应用免疫印记法检测细胞上清液中膜突蛋白表达量,流式细胞仪对细胞表面膜突蛋白抗原表达量和细胞凋亡进行检测,同时应用激光共聚焦显微镜和电子显微镜评判HPMEC形态和功能的变化,用独立样本t检验和单因素方差分析进行统计学处理。结果①TNF-α作用后HPMEC上清液中和细胞膜表面的膜突蛋白表达量均较对照组显著增加（P＜0.01）;②TNF-α+MmAb组致HPMEC凋亡率显著高于TNF-α组（31.4%与14.1%,P＜0.01）,亦显著高于MmAb组（31.4%与3.89%,P＜0.01）;③TNF-α+MmAb共同作用在激光共聚焦显微镜下可见HPMEC骨架结构F-actin功能丧失、逐渐出现核浓聚和细胞凋亡,在电镜下可见HPMEC微绒毛明显减少,近乎消失。结论 HPMEC有膜突蛋白表达,在TNF-α作用下细胞外可检测到膜突蛋白,MmAb可以对HPMEC造成损伤,主要表现为对数生长期的细胞出现骨架蛋白结构改变和早期凋亡。

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来源
《中华风湿病学杂志》 |2010年第4期||共页
作者
李梦涛; 尹雷; 王迁; 郑文洁; 何建国; 曾小峰;
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作者单位

1. 中国医学科学院北京协和医院风湿免疫科 2. 中国医学科学院阜外心血管病医院肺血管病研究中心;

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正文语种 chi
中图分类自身免疫性疾病、结缔组织疾病;肺动、静脉疾病;
关键词
抗体; 单克隆; 细胞凋亡; 人肺微血管内皮细胞; 膜突蛋白;

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