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透明质酸保护组织工程软骨拮抗硝普钠抑制作用的机制研究

         

摘要

目的研究透明质酸对壳聚糖复合支架与再分化软骨细胞构建的组织工程软骨的保护作用。方法藻酸钠微球包被体外单层扩增培养的去分化软骨细胞2周以恢复其表型,Ⅱ型胶原蛋白表达的免疫组织化学监测分化状态。扫描电镜观察再分化软骨细胞在壳聚糖复合支架上的生长,3周后用硝普钠或(和)透明质酸以及β1整合素特异性阻断抗体作用于该组织工程软骨,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测软骨特异性的Ⅱ型胶原或聚集蛋白聚糖(aggrecan)的表达。结果藻酸钠微球包被去分化软骨细胞2周能显著提高Ⅱ型胶原的表达。壳聚糖支架支持再分化软骨细胞的贴附、增殖和迁徙。硝普钠呈剂量依赖性地抑制组织工程软骨上的软骨细胞Ⅱ型胶原和aggrecan mRNA的表达,而透明质酸显著提高Ⅱ型胶原和aggrecan mRNA的表达。当用特异性抗体阻断β1整合素后,透明质酸不能逆转硝普钠对组织工程软骨中Ⅱ型胶原蛋白表达的抑制作用。结论藻酸钠微球包被去分化的软骨细胞2周能恢复细胞的表型。透明质酸通过β1整合素信号通路拮抗低浓度硝普钠对组织工程软骨的抑制作用,保护软骨组织。

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