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系统性红斑狼疮外周血单个核细胞基因表达系列分析文库的建立

摘要

目的 构建系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)外周血单个核细胞基因表达系列分析(serial analysis of gene expression,SAGE)文库.方法从3例家族性SLE患者外周血单个核细胞分离Poly A RNA,采用改良的SAGE技术构建SAGE文库,随机挑选阳性克隆进行菌落PCR鉴定及对部分阳性克隆进行测序.结果 初步构建的SAGE文库已获得600个克隆,随机取50个进行菌落聚合酶链反应(PCR)分析,其中43个克隆中质粒插入片段大于300 bp,占86%.部分克隆测序证实含有序列正确的SAGE标签.结论 应用改良SAGE的技术成功构建了SLE外周血单个核细胞SAGE文库,为筛选SLE患者差异表达基因奠定了基础.

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