外周血单个核细胞

摘要： 目的探讨自体外周血单个核细胞(PBMNCs)移植术治疗难治性重度肢体缺血性疾病(NO-CLI)。通过确立无应答患者的独立危险因素进行疗效评估,以期为自体PBMNCs移植治疗NO-CLI患者的疗效预测提供重要依据。方法回顾性分析大连大学附属新华医院40例自体PBMNCs移植治疗NO-CLI患者的信息,统计患者的基线数据、移植物信息和术后6个月的治疗效果,最后进行Logistic回归分析。结果通过筛选后36例符合入组标准,其中30例NO-CLI患者行自体PBMNCs移植治疗效果良好,6例术后效果不佳最终行截肢手术。通过单因素回归分析得出吸烟、复吸烟、性别、肢体坏疽或感染、动脉闭塞平面、踝肱指数(ABI)、经皮氧分压(TcPO_(2))、炎症反应、糖尿病均是影响自体PBMNCs移植术治疗NO-CLI疗效的因素(P<0.05)。通过多因素回归分析结果提示TcPO_(2)是影响自体PBMNCs移植术治疗NO-CLI疗效的独立因素(P<0.05)。结论影响自体PBMNCs移植术治疗NO-CLI疗效的因素较多。其中对自体PBMNCs移植术治疗NO-CLI疗效的预测性评判采用TcPO_(2)指标具有较高的应用价值。

摘要： 目的通过生物信息学方法分析中老年女性骨关节炎(osteoarthritis,OA)患者与正常人(NC)外周血单个核细胞(PBMCs)基因表达谱差异,探索血液中OA的诊疗靶点。方法从GEO数据库中下载GSE48556数据集。用R语言筛选出OA和NC之间的差异表达基因。利用基因集合富集分析(GSEA)获取目的基因子集;通过DAVID对其进行GO和KEGG通路分析。用STRING和Cytoscape软件构建PPI网络,Mcode和centiscape插件进行模块分析,Cytohubba筛选出关键基因。结果GSEA分析及P.adjust0.2筛选出292个目的基因,其中上调81个,下调211个,对其进行GO富集分析主要集中在“NIK/NF-κB的调节”、“单核细胞增殖”、“凋亡信号通路的调控”、“TNF介导的信号通路”、“Wnt信号通路的调控”、“MAP激酶活性的调节”和“自噬的调节”等生物功能上;KEGG主要富集在以下4条通路:自然杀伤细胞介导的细胞毒性、TNF信号通路、MAPK信号通路和细胞凋亡。利用PPI网络及相关插件筛选出MAPK1、I L10、PTGS2、IL18、GSK3B、NFKBIA、TNFRSF1A、EGR1八个核心基因与OA炎症和细胞凋亡高度相关。结论通过生物信息学分析发现OA和NC的PBMCs基因表达差异集中在细胞凋亡和炎症反应,使其成为OA的诊疗靶点。

摘要： 目的:探讨Toll样受体7激动剂gardiquimod刺激肾癌患者外周血单个核细胞(PBMCs)抗肿瘤的作用机制。方法:将肾癌患者外周血单个核细胞和肾癌细胞共同培养,使用TLR7激动剂刺激肾癌患者外周血单个核细胞(PBMCs),将TLR7激动剂激活的PBMCs转染shRNA(lnc-DC/STAT3)和shRNA(lnc-THRIL)并分为4组:对照组、TLR7激动剂组、shRNA lncDC组和shRNA lnc-THRIL组。应用Real-time PCR检测lnc-DC和lnc-THRIL表达量;Western blot检测STAT3、p-STAT3、P21、P27表达量;Cr释放实验检测PBMCs抗肿瘤细胞活性变化;流式细胞术检测肾癌细胞周期变化。结果:TLR7激动剂刺激PBMCs组中lnc-DC的mRNA水平表达量明显增高,shRNA lnc-DC组lnc-DC表达量较对照组明显降低,shRNA lnc-THRIL组lnc-THRIL表达量较对照组明显降低(P<0.05);抗肿瘤相关指标分子表达增加;与对照组相比,TLR7组中肾癌细胞的P27蛋白表达量明显增加,而P21蛋白表达量无明显变化,TLR7激动剂+shRNA lnc-DC组P27蛋白表达量与TLR7组明显降低(P<0.05),与对照组相比差异无统计学意义;TLR7激动剂+shRNA lnc-THRIL组较TLR7激动剂组的P21和P27表达量均有降低;TLR7激动剂3个实验组中STAT3蛋白表达量无明显差异,pSTAT3在TLR7激动剂+shRNA lnc-DC组中明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);PBMCs对肾癌细胞的杀伤率在TLR7激动剂+shRNA lnc-DC组较另外两实验组明显降低,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论:TLR7激动剂经lnc-DC/STAT3而非lnc-THRIL途径刺激肾癌患者PBMCs增强抗肿瘤作用,pSTAT3表达量与抗肿瘤增殖密切相关,并可能影响P27周期调节蛋白表达导致肾癌细胞周期停滞。

摘要： 葡萄胎来源的滋养细胞和正常妊娠来源的滋养细胞均起源于胚胎的外胚层,受到父系印迹基因的调控。正常妊娠来源的妊娠早期滋养细胞可通过表达非经典人类白细胞抗原以及诱导免疫细胞的抑制表型等多种机制诱导母胎界面局部免疫耐受,以保护胚胎的正常生长发育。然而,目前对葡萄胎免疫学改变的了解仍有限。近年来研究发现葡萄胎来源的滋养细胞与母胎界面局部免疫细胞相互作用是影响其清宫术后预后的重要因素。葡萄胎患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)免疫状态与葡萄胎的发生、发展密切相关,其反映了患者免疫系统对葡萄胎持续妊娠作出的适应性改变。为探讨葡萄胎上述免疫学特点,就近年关于葡萄胎母胎界面免疫细胞组成及其PBMC免疫状态相关研究进展进行综述。

摘要： 应用调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)进行过继性细胞治疗以促进移植免疫耐受的可能性仍在积极探索中。其中,特定移植背景和治疗方案对Treg生成的影响尚不明确。美国学者分别选取肝移植手术前及术后患者和健康对照者的外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),使用贝拉西普(belatacept)体外共刺激阻断,以比较不同来源细胞是否适于制备Treg。

摘要： 目的探讨3种外周血单个核细胞(PBMC)分离方法对后续流式细胞术分析结果的影响,并比较PBMC冻存前后流式细胞术分析结果。方法2019年5月,选择四川大学华西医院人类疾病和免疫治疗研究室6位体检健康的工作人员为受试对象,采集每位受试者外周血15 mL,平均分为3份,分别采用Ficoll离心法、羟乙基淀粉(HES)沉降法和HES+Ficoll法分离PBMC。显微镜下观察3种方法分离所得PBMC的形态,并采用细胞计数仪进行细胞计数。分离所得PBMC于冻存前和冻存6个月后行流式细胞术分析,计算PBMC中淋巴细胞所占比例、淋巴细胞中活细胞(FVS780荧光强度小于102为活细胞)所占比例(细胞存活率)和活细胞中CD4^(+)T细胞数与CD8^(+)T细胞数的比值(CD4^(+)T/CD8^(+)T)。结果3种分离方法得到的PBMC形态均一致。与其他2种分离方法相比,HES沉降法分离得到的PBMC除淋巴细胞外还有部分红细胞。HES沉降法所得PBMC数量显著多于Ficoll离心法与HES+Ficoll法(P0.05);HES沉降法得到的PBMC中淋巴细胞比例显著低于Ficoll离心法和HES+Ficoll法(P0.05);Ficoll离心法、HES沉降法与Ficoll+HES法得到的存活细胞中CD4^(+)T/CD8^(+)T比值比较差异无统计学意义(P>0.05)。3种方法分离得到的PBMC冻存后淋巴细胞存活率均低于冻存前(P0.05)。结论HES沉降法分离得到的PBMC纯度(混有少量红细胞)不如其他2种方法,但其操作更为简便。且无论是冻存前的PBMC还是冻存6个月后的细胞,流式细胞术分析3种方法分离得到的PBMC的结果无统计学差异,因此,HES沉降法适用于抗凝全血的PBMC分离提取。

摘要： 目的检测肝细胞癌(HCC)患者接受经导管动脉化学治疗栓塞术(TACE)治疗后外周血单个核细胞中沉默信息调节因子7(SIRT7)的表达水平,并分析其与患者预后的关系。方法选择2016年8月至2018年3月在武警北京市总队医院就诊的104例HCC患者作为研究对象。根据患者预后3年生存情况将其分为生存组(n=71)和死亡组(n=33)。采用Ficoll密度梯度离心法提取外周血中的单个核细胞。采用蛋白质印迹法检测单个核细胞中SIRT7的表达水平。采用ROC曲线评估SIRT7判断经TACE治疗的HCC患者预后的效能。采用Cox比例风险回归模型分析经TACE治疗的HCC患者预后的影响因素。结果与治疗前比较,生存组和死亡组治疗后SIRT7的表达水平均较低,差异均有统计学意义(P均<0.05)。与死亡组比较,生存组治疗前和治疗后SIRT7的表达水平均较低,差异均有统计学意义(P均<0.05)。治疗后SIRT7水平判断HCC患者预后生存的ROC曲线下面积(AUC)大于治疗前SIRT7水平及治疗前后SIRT7水平的差值(P均<0.05)。Cox比例风险回归模型分析结果显示,肿瘤分期、肿瘤直径和治疗后SIRT7是经TACE治疗的HCC患者预后生存的独立危险因素(P<0.05),索拉非尼和利卡汀是其独立保护因素(P<0.05)。结论经TACE治疗的HCC患者外周血单个核细胞中SIRT7的表达水平与患者预后生存情况有关。

摘要： 目的探究miR-216a对人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)来源的巨噬细胞特性的影响。方法分离并培养人PBMCs,诱导建立M1和M2型巨噬细胞极化模型,采用流式细胞术和实时荧光定量PCR方法检测巨噬细胞的表面标记物。进一步,将miR-216a模拟物转染至M2型巨噬细胞,检测M2型巨噬细胞特异标记物及炎性因子基因的表达。结果过表达miR-216a后,M2型巨噬细胞表面标记物CD163的表达水平显著增加,促炎细胞因子TNF-α和IL-1β的表达水平降低,而抗炎细胞因子TGF-β和IL-10的表达水平显著升高(P<0.05)。结论miR-216a可促进人PBMCs衍生的巨噬细胞向M2型极化并抑制炎性细胞因子表达。

摘要： 目的分析外周血单个核细胞miR-132对老年急性髓系白血病(AML)预后的预测价值。方法选择老年AML患者83例,选择同期行骨髓标本检验的非白血病老年人50例为对照组,检测并比较两组外周血单个核细胞miR-132表达。所有患者采用地西他滨+高山尖杉酯碱+阿糖胞苷化疗,对可能影响患者预后的各因素进行单因素及多因素Logistic回归分析。结果AML组外周血单个核细胞miR-132相对表达量显著高于对照组(P<0.05)。对可能影响患者预后的各因素进行单因素及多因素Logistic回归分析,结果显示,染色体核型、外周血单个核细胞miR-132相对表达量及首次治疗情况进行回归模型,为影响患者预后的独立危险因素。Kaplan-Meier生存曲线比较,miR-132低表达患者生存情况显著优于miR-132高表达患者(P<0.05)。根据患者随访情况,将随访总体生存时间(OS)超过12个月作为预后良好组,OS不足12个月作为预后不良组,预后良好组miR-132相对表达量显著低于预后不良组(P<0.05)。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-132对患者预后的预测价值,曲线下面积为0.875。结论老年AML患者外周血单个核细胞miR-132表达异常升高,且miR-132表达与患者预后密切相关,可作为患者预后预测的潜在生物学指标之一。

摘要： 目的探讨不同淋巴细胞亚群的绝对值和功能对于评估肾移植受者术后早期发生病毒感染风险的预测和诊断价值。方法将95例肾移植受者纳入前瞻性观察队列研究,根据术后的免疫状态分为稳定组(77例)和感染组(18例)。分别于术前、术后2周、术后1个月、术后2个月、术后6个月采集外周血样本进行流式细胞检测。比较两组CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞、自然杀伤(NK)细胞绝对值的动态变化,通过检测干扰素(IFN)-γ^(+)CD4^(+)T细胞、IFN-γ^(+)CD8^(+)T细胞、IFN-γ^(+)NK细胞比例分析两组受者淋巴细胞亚群功能,评估淋巴细胞亚群绝对值和功能在肾移植术后早期对病毒感染的预测和诊断价值。结果在病毒感染时,感染组的CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞、NK细胞绝对值整体处于相对较低的水平;在术后2个月时,感染组的CD4^(+)T细胞、NK细胞绝对值均低于稳定组;在术后6个月时,感染组的CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞绝对值均低于稳定组(均为P<0.05)。在病毒感染时,感染组的IFN-γ^(+)CD4^(+)T细胞、IFN-γ^(+)CD8^(+)T细胞、IFN-γ^(+)NK细胞比例均处于相对较低的水平,尤以IFN-γ^(+)CD8^(+)T细胞比例降低最为显著;在术后2个月,感染组的IFN-γ^(+)CD8^(+)T细胞、IFN-γ^(+)NK细胞比例显著高于稳定组;在术后6个月,感染组的IFN-γ^(+)CD4^(+)T细胞、IFN-γ^(+)CD8^(+)T细胞比例均高于稳定组(均为P<0.05)。logistic回归分析结果显示,术后2个月时,IFN-γ^(+)CD8^(+)T细胞和IFN-γ^(+)NK细胞比例的升高与病毒感染风险增加均相关(均为P<0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线结果表明,淋巴细胞亚群绝对值联合其IFN-γ分泌功能对于免疫状态低下的受者病毒感染的诊断价值显著高于单用淋巴细胞亚群绝对值(P<0.05)。结论动态监测淋巴细胞亚群绝对值和功能的变化对病毒感染的预测、诊断及指导用药具有重要参考价值。

摘要： 目的：研究类风湿关节炎患者外周血单个核细胞TLR4/NF-κb/TNF-α信号通路的表达与患者骨损害的关系. 方法：选择2013年5月-2015年5月期间在本院治疗的30例类风湿关节炎患者为观察组,并以30例健康体检人群作为对照组,收集两组外周血单个核细胞观察LR4/NF-κb/TNF-α信号通路的表达情况,探讨LR4/NF-κb/TNF-α与患者炎症指标、骨损害的关系. 结果：RA患者TLR2、TLR4、NF-κB mRNA表达水平分别为3.54±1.39、3.78±1.26、2.79±0.98,明显高于健康成人水平;X线提示有骨损害组患者29例TLR2、TLR4、NF-κB mRNA水平分别为4.64±1.65、5.12±2.12、4.85±1.75明显高于无X线损害骨损害患者;RA患者关节损伤越严重TLR2、TLR4、NF-κB mRNA表达水平越高,且组间差异具有统计学意义,P＜0.05;TLR2、TLR4、NF-κB mRNA表达水平均与关节压痛指数、血沉、C反应蛋白、类风湿因子、关节功能分级、X线分期成正相关(P＜0.05). 结论：类风湿关节炎患者TLRs/NF-κB信号通路表达与骨损害密切相关.

摘要： 目的：探究外周血单个核细胞体外增殖抑制试验预测突发性聋患者听力预后的临床观察。rn 方法:选择2013年7月至2015年10月于本院接受治疗的突发性聋患者60名，在治疗前抽取空腹外周血，提取PBMC进行工VPGCIT，细胞培养分为四组:A组为不添加药物的空白对照，B组加LPS，刺激PBMC的增殖，C组同时加入LPS和地塞米松,D组为不添加细胞仅有培养基的空白组。rn 结果:培养24小时后，所有患者的PBMC均可被DEX抑制，但抑制程度有很大差异。将所有患者PBMC增殖抑制率与其各自受损频率PTA改善程度进行相关性分析，结果显示二者之间存在正的直线相关关系。rn 结论:SSNHL患者PBMC的增殖GC抑制率和发病至就诊时间与听力改善程度之间存在直线相关关系。PBMC的增殖GC抑制率与听力预后间的关系更为密切。GC治疗有效的患者PBMC被DEX抑制程度显著高于GC治疗无效组，PBMC的工VPGC工T可以预测SSNHL患者对GC的敏感性，为将来制定突发性聋个体化治疗奠定了基础。

摘要： 目的：检测寻常性银屑病患者外周血单个核细胞(PBMC)miR-146a的表达情况,并探讨其与寻常性银屑病发病的相关性. 方法：应用实时荧光定量聚合酶链反应检测30例寻常性银屑病患者及正常对照组外周血中PBMC中的miR146a的相对表达量.并探讨其与寻常性银屑病患者病情活动指标之间的关系.另取30例正常人作为对照组. 结果：寻常性银屑病患者外周血中PBMC中的miR-146a的拷贝数显著高于正常对照组(P＜0.01),进行期患者组显著高于静止期患者组(P＜0.05).且外周血中PBMC中的miR-146a的表达变化与寻常性银屑病严重程度指数PASI评分呈正相关性(r=0.617,P＜0.05). 结论：寻常性银屑病患者外周血PBMC的miR-146a异常高表达,并与寻常性银屑病的分期相关,提示miR-146a在寻常性银屑病的发病中起重要作用.

摘要： 目的:了解原发性痛风(PG)不同中医证型患者外周血单个核细胞(PBMCs)核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)基因转录剪接体mRNA表达水平及作用。rn 方法:用半定量聚合酶链反应(RT-PCR)法检测96例PG患者和30名健康对照(HC) PBMCs NLRP3基因及转录剪接体mRNA表达水平;用Western Blot法检测PG患者和HC PBMCs NLRP3、核因子-κB(p105/p50)[NF-κB(p105/p50)]蛋白表达水平;用ELISA检测PG患者和HC血清IL-1β、IL-2、TNF-α表达水平,用免疫比浊法测定PG患者和HC血清CRP含量。rn 结果:PG急性与非急性期组以及湿热瘀阻证(ODHS)、痰瘀互结证(IPSBS)、脾虚湿困证(PDIDS)、气血亏虚证(QBDS)各组NLRP3基因及转录剪接体mRNA、NLRP3与NF-κB(p105/p50)蛋白、血清IL-1β、IL-2、TNF-α、CRP表达与HC组比较均具有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01),且各组间相比较也具有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).rn 结论:PG不同期及IPSBS、ODHS、PDIDS、QBDS患者PBMCs中NLRP3基因及转录剪接体mRNA、NLRP3蛋白、血清致炎因子均表达异常,提示在PG不同期及不同中医证型患者的炎症反应中NLRP3基因及各转录剪接体可能发挥重要的调控作用。

摘要： 本研究通过FMDV对猪进行攻毒，感染后出现典型临床症状时采集血液，并进行PBMC分离，应用Trizol法提取总RNA，用Agilenl2100进行总RNA质量检测，样品检测合格后构建cDNA文库，然后利用高通量测序技术进行转录组测序，通过与参考基因组进行比对、寻对样品与参考序列之间基国表达水平进行分析，并通过GO、KEGG富集分析和蛋白互作网络分析等方法，对差异表达基因功能和分类进行分析，构建样品之间的差异表达的转录谱。

摘要： 目的：探讨EV71感染对PBMC的作用及主要信号转导通路的激活,寻找介导免疫损伤的信号分子节点. 方法：RT-PCR法检测JAK-STAT信号通路介导的关键转录因子IRF1、IP-10基因的表达以及WESTERN-BLOT法检测P-STAT1的表达. 结果：RT-PCR结果证实：EV71病毒诱导了PBMC的IRF1、IP-10基因的表达;WESTERN-BLOT方法结果表明：EV71病毒作用于PBMC诱导了STAT1的磷酸化. 结论:EV71通过激活JAK-STAT信号转导通路诱导IP-10在PBMC的生成，使被EV71感染的PBMC中大量生成和释放IP-lOoSTAT1在EV71感染PBMC激活JAK-STAT信号通路中起着极其重要的作用。EV71通过激活的STAT1启动IRF-1转录从而启动IP-10转录，EV71诱导的JAK-STAT信号通路的激活是EV71感染引起相关免疫损伤的发病机制之一。

摘要： 本研究通过对多病种及不同病程的化疗患者的血管状况进行分析,评估了不同化疗药物及临床护理手段对外周血单个核细胞(PBMC)采集的影响,为PBMC高效采集及积极规避相关风险提供参考依据及方法.

摘要： 目的：研究狼疮定对SLE外周血单个核细胞(PBMC)CD70基因表达及其基因启动子区DNA低甲基化状态的影响.rn 方法：中药含药血清或正常血清分别处理SLE患者或健康体检者PBMC,RT-PCR法检测狼疮定对PBMC CD70基因RNA表达的影响;分离样品基因组DNA,变性,重亚硫酸盐处理后DNA纯化、去硫酸化沉淀,设计CD70启动子区去甲基化和甲基化的特异性引物,以甲基化特异PCR方法(MSP)进行CD70基因启动子区DNA甲基化状态检测.rn 结果：20例SLE患者PBMC体外培养并以10％胎牛血清处理48h后,CD70mRNA表达水平显著高于正常人(P=0.037);含药血清处理48h后的SLE患者PBMC的CD70启动子区甲基化水平较胎牛血清处理48h后显著增高(P＜0.0001).rn 结论：SLE患者PBMC存在低甲基化状态,狼疮定能抑制SLE患者PBMC的CD70基凶表达,并促进CD70基因启动子区DNA的甲基化.

摘要： 目的：探讨雷公藤药材提取物的高效液相色谱图谱中特征峰与免疫抑制药效的相关性,为确定雷公藤免疫抑制活性的物质基础提供依据.rn 方法：对八个产地雷公藤药材分别进行提取纯化,采用高效液相色谱法(HPLC)建立各产地雷公藤提取物的指纹图谱.利用密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞(PBMC),分为空白处理组、模型组、系列浓度的药物处理组.各组PBMC在空白或模型或药物处理48h后用ELISA试剂盒检测细胞上清中IFN-γ和IL-2的含量.对各产地指纹图谱信息和药效实验数据进行标准化处理,然后利用偏最小二乘法进行谱效关系分析.rn 结果：与模型组相比,各浓度给药组IFN-γ和IL-2含量均显著降低(P＜0.05),不同产地雷公藤提取物对IFN-γ和IL-2的IC50值有差异.在雷公藤29个特征峰中,对抑制IL-2作用贡献由强到弱的各峰顺序为：23＞21＞19＞26＞27＞7＞8＞15＞9＞17＞6＞1＞20＞5＞10＞22＞3;对抑制IFN-γ作用贡献由强到弱的各峰顺序为：27＞7＞23＞21＞26＞8＞9＞15＞1＞6,10＞28＞5＞25＞19＞3,4.rn 结论：第1、3、5、6、7、8、9、10、15、19、21、23、26、27号峰是雷公藤免疫抑制作用的主要药效峰,是雷公藤发挥免疫抑制作用的主要成分.

摘要： 目的：在减低剂量放射线预处理方案下,观察来源于C57BL/6孕鼠的FNPB单个核细胞对MRL/lpr小鼠的作用.rn 方法：20周龄MRL/lpr小鼠被随机分成3组(n=15只/组)：对照组小鼠不经任何治疗;放疗组小鼠仅行放射线治疗;输注组小鼠行放射线照射后给予FNPB单个核细胞输注.分析各组小鼠死亡率、体重和脾脏指数改变情况,并采用ELISA法检测各组小鼠血清抗ds-DNA抗体、ANA、IL-17和TGF-β,采用苦味酸法检测小鼠血清肌酐,采用考马斯亮蓝法检测小鼠24h尿蛋白.采用流式细胞技术分析各组小鼠外周血Th1、Th2、Th17、Treg细胞和CD8+T细胞变化情况.对各组小鼠肾脏组织HE染色并行显微镜病理检查.rn 结果：输注组在提高MRL/lpr小鼠生存率，增加体重，减小脾脏指数，减少血清抗ds-DNA抗体、ANA和肌酐，减少24h尿蛋白及改善肾脏病理损害方面均明显优于对照组和放疗组，并且在输注组MRL/lpr小鼠中没有观察到GVHD。输注组小鼠在造血重建(白细胞、红细胞和血小板恢复)也优于放疗组小鼠。rn 结论：非清髓放射线预处理后FNPH单个核细胞输注对MRL/lpr小鼠CD4+细胞及其Thl/Th2,Th17/Treg平衡和其相应的细胞因子具有显著的调控作用，使其免疫进程得到控制和改善，从而对MRL/lpr小鼠具有安全有效的治疗作用。因此，非清髓非血缘FNPB单个核细胞输注为临床脐血移植治疗SLE患者提供了动物试验证据及临床应用可能。

摘要： 本发明公开了一种由外周血单核细胞（PBMC）重编程为人诱导性多能干细胞的重编程系统及培养方法。所述重编程系统包含重编程诱导培养液和一个或多个载体，所述一个或多个载体能够表达人转录因子OCT4、p53基因表达抑制剂和Cohesin基因表达抑制剂；其中所述重编程诱导培养液包含IX‑PSC基础培养基以及GSK‑3抑制剂、去乙酰化酶抑制剂、MEK抑制剂、ROCK抑制剂和4‑羟乙基哌嗪乙磺酸。使用所述系统及培养方法能够提高细胞重编程效率，缩短人诱导性多能干细胞的制备周期，节约人诱导性多能干细胞的制备成本。

摘要： 本发明公开了一种由外周血单核细胞（PBMC）重编程为人诱导性多能干细胞的重编程系统及培养方法。所述重编程系统包含重编程诱导培养液和一个或多个载体，所述一个或多个载体能够表达人转录因子OCT4、p53基因表达抑制剂和Cohesin基因表达抑制剂；其中所述重编程诱导培养液包含IX‑PSC基础培养基以及GSK‑3抑制剂、去乙酰化酶抑制剂、MEK抑制剂、ROCK抑制剂和4‑羟乙基哌嗪乙磺酸。使用所述系统及培养方法能够提高细胞重编程效率，缩短人诱导性多能干细胞的制备周期，节约人诱导性多能干细胞的制备成本。

摘要： 本发明涉及一种外周血单个核细胞的体外提取装置及外周血单个核细胞的提外提取方法。该外周血单个核细胞的体外提取装置的第一轴移动组件和第二轴移动组件通过移动架滑动而带动移液机构在第一轴和第二轴上滑动，且移液机构在移动架上沿第三轴滑动而使移液机构能够伸入容器中，驱动组件给移液机构提供一吸取物质的力和一释放物质的力，以使移液机构能够吸取物质和释放物质，电路控制组件能够根据视觉传感器组件采集的图像计算出样品中的白膜层的位置，并控制第一轴移动组件、第二轴移动组件、驱动组件和移液机构工作以使移液机构吸取样品中的白膜层。上述外周血单个核细胞的体外提取装置的提取率较高且提取的外周血单个核细胞的纯度较高。

摘要： 本发明公开了一种白细胞介素21和4‑1BBL诱导外周血单个核细胞中NK细胞增殖的方法。该方法包括如下步骤：将初始NK细胞与固相化的细胞因子共培养，使NK细胞增殖。实验结果表明：利用固定化的细胞因子直接刺激未经筛选的人外周血中的淋巴细胞群，大量扩增了具有杀伤活性的原代NK细胞，并将刺激NK细胞的信号传导转化为人为可控的形式，在临床上为NK细胞治疗提供了安全有效、便利且效果稳定的扩增方案，并为随后的改造NK细胞和研究信号传导机制提供基础研究。

摘要： 本发明涉及一种外周血单个核细胞核纹理分析方法，该方法包括如下步骤：首先对外周血细胞进行染色，然后摄取经染色后的外周血细胞的核表面图像，接着对核表面图像进行曲线波变换，得到一与所述核表面图像的图像特征相对应的系数矩阵，最后对系数矩阵进行变换处理完成对核表面图像的分类识别。与现有技术相比，本发明的优点在于：将曲线波变换结合模式识别应用于外周血单个核细胞的核纹理图像分析，准确高效地实现了正常细胞与病态细胞的分类识别。在不需要昂贵的仪器和试剂的条件下，就能实现快速初步判断HIV载量与外周血中单个核细胞受损程度方面有一定的参考意义。

摘要： 本发明发现了癌症在宿主的T细胞和外周血单个核细胞(PBMC)的DNA中具有DNA甲基化标志物。本发明公开了源自PBMC的DNA的CG IDs，通过上述CG IDs在PBMC或T细胞的DNA中的甲基化水平预测肝细胞癌(HCC)临床进展分期和慢性肝炎。本发明还公开了，一种通过使用本发明所识别的CG IDs来预测HCC的试剂盒，以及焦磷酸测序DNA甲基化实验、受试者工作特征(ROC)实验、惩罚回归实验和层级聚类分析在预测HCC中的应用。本领域任一技术人员均可以使用本发明来获得用于任何癌症和任何癌症临床进展分期的DNA甲基化标志物。本发明描述的DNA甲基化标志物(CG IDs)将用于诊断：a.癌症；b.癌症不同临床进展分期；c.正在接受治疗的患者对治疗的反应；d.慢性乙型肝炎或慢性丙型肝炎。

摘要： 本发明公开了一种结核杆菌融合蛋白及其在诱导外周血单个核细胞产生细胞因子的应用。本发明的融合蛋白包含PPE41、ESAT‑6和PE25三个蛋白，蛋白之间通过连接肽连接。本发明提供的融合蛋白与现有的刺激物相比，其作用更高效、敏感性更强、特异性更高、刺激效果好。同时，本发明融合蛋白刺激PBMC产生大量结核杆菌抗原特异性的IFN‑γ、IL‑2、TNF‑α等结核相关因子，且这一刺激诱导反应不受卡介苗的干扰。本发明将更有效的提高结核病的检出率，对结核病的控制具有积极的意义。本发明的融合蛋白作为刺激物，可应用于结核病致病及免疫预防机制的研究，以及进一步的对结核病的控制中。

摘要： 本发明涉及一种外周血单个核细胞的体外提取装置及外周血单个核细胞的提外提取方法。该外周血单个核细胞的体外提取装置的第一轴移动组件和第二轴移动组件通过移动架滑动而带动移液机构在第一轴和第二轴上滑动，且移液机构在移动架上沿第三轴滑动而使移液机构能够伸入容器中，驱动组件给移液机构提供一吸取物质的力和一释放物质的力，以使移液机构能够吸取物质和释放物质，电路控制组件能够根据视觉传感器组件采集的图像计算出样品中的白膜层的位置，并控制第一轴移动组件、第二轴移动组件、驱动组件和移液机构工作以使移液机构吸取样品中的白膜层。上述外周血单个核细胞的体外提取装置的提取率较高且提取的外周血单个核细胞的纯度较高。

摘要： 本发明公开了一种白细胞介素21和4-1BBL诱导外周血单个核细胞中NK细胞增殖的方法。该方法包括如下步骤：将初始NK细胞与固相化的细胞因子共培养，使NK细胞增殖。实验结果表明：利用固定化的细胞因子直接刺激未经筛选的人外周血中的淋巴细胞群，大量扩增了具有杀伤活性的原代NK细胞，并将刺激NK细胞的信号传导转化为人为可控的形式，在临床上为NK细胞治疗提供了安全有效、便利且效果稳定的扩增方案，并为随后的改造NK细胞和研究信号传导机制提供基础研究。

摘要： 本发明涉及一种外周血单个核细胞核纹理分析方法，该方法包括如下步骤：首先对外周血细胞进行染色，然后摄取经染色后的外周血细胞的核表面图像，接着对核表面图像进行曲线波变换，得到一与所述核表面图像的图像特征相对应的系数矩阵，最后对系数矩阵进行变换处理完成对核表面图像的分类识别。与现有技术相比，本发明的优点在于：将曲线波变换结合模式识别应用于外周血单个核细胞的核纹理图像分析，准确高效地实现了正常细胞与病态细胞的分类识别。在不需要昂贵的仪器和试剂的条件下，就能实现快速初步判断HIV载量与外周血中单个核细胞受损程度方面有一定的参考意义。