肝炎病毒,乙型

摘要： 目的 分析赖氨酸特异性去甲基化酶6B(KDM6B)在乙型肝炎相关性肾炎(HBV-GN)患者肾组织及乙型肝炎病毒X基因(HBx)转染的人足细胞中的表达,及其在HBx介导的足细胞-巨噬细胞转分化(PMT)中的作用.方法 选取2013至2018年在上海交通大学附属第一人民医院经肾穿刺活检病理诊断为HBV-GN的48例患者肾活检标本,以30例原发性肾小球肾炎(PGN)肾活检标本及15例肾肿瘤患者癌旁正常肾组织作为对照.利用免疫荧光及免疫组化法观察HBV-GN患者肾组织KDM6B及巨噬细胞标志物F4/80的表达.分析肾组织KDM6B表达水平与HBV-GN患者临床特征的关系.Western印迹法检测足细胞中KDM6B、F4/80、主要组织相容性复合体Ⅱ(MHC-Ⅱ)以及共刺激分子CD40的表达;ELISA法测定细胞上清中γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-6的含量;同时利用KDM6B小干扰RNA(siRNA)沉默HBx质粒转染的人足细胞中KDM6B基因表达后,Western印迹法检测细胞中KDM6B、F4/80及组蛋白H3第27位赖氨酸三甲基化(H3K27me3)的表达变化.结果 与正常对照组相比,HBV-GN患者肾组织KDM6B表达增加(0.022±0.004比0.006±0.002,P=0.006).HBV-GN不同病理类型组间KDM6B阳性率差异无统计学意义(P=0.139).此外,在HBV-GN患者足细胞中可观察到KDM6B和F4/80的共表达.估算肾小球滤过率(eGFR)＜60 ml·min-1·(1.73 m2)-1或尿蛋白≥3.5 g/d的患者肾组织KDM6B表达分别高于eGFR≥60 ml· min-1·(1.73 m2)-1或尿蛋白＜3.5 g/d的患者(均P＜0.05).HBx转染人足细胞后KDM6B、F4/80、MHC-Ⅱ以及CD40表达均上调(均P＜0.05),上清IFN-y和IL-6含量均增加(均P＜0.05);将KDM6B基因沉默后,HBx所诱导的足细胞F4/80表达下调,H3K27me3表达则上调(均P＜0.05).结论 HBx可通过诱导足细胞KDM6B表达启动PMT,可能参与HBV-GN局部组织免疫微环境紊乱的发生.

摘要： 目的 探讨HBsAg阳性妊娠期妇女HBV血清标志物模式、HBVDNA载量、ALT、AST与母婴传播阻断效果之间的关系,评估发生母婴传播的风险.方法 选取2012年7月至2015年6月参加乙型肝炎母婴传播阻断项目的657例HBsAg阳性母亲及662例新生儿(含5对双胞胎)为研究对象,检测孕妇的HBV血清标志物、HBV DNA载量及肝功能指标,在新生儿7月龄时测定HBV血清标志物和HBV DNA,以探讨新生儿感染HBV情况与母亲孕晚期相关检测指标的关系.结果 HBsAg/HBeAg双阳性组孕妇HBVDNA载量、ALT和AST异常比例显著高于HBeAg 阴性组孕妇(HBV DNA:1×108vs.850 IU/mL,Z=-21.554,P＜0.01;ALT:13.1％vs.6.6％,x2=7.536,P＜0.01;AST:17.2％vs.5.5％,x2=20.780,P＜0.01);HBsAg 和抗-HBc 阳性组孕妇HBV DNA 水平显著高于HBsAg、抗-HBe和抗-HBc阳性组孕妇(1 745vs.804 IU/mL,Z=-2.313,P＜0.05);随病毒载量的升高,ALT及AST异常率呈现逐步上升的趋势(x2趋势=19.309和32.502,P均＜0.01).接受主被动联合免疫后,仅HBeAg阳性,且HBV DNA＞2×105IU/mL母亲分娩的16例新生儿发生了感染.结论 HBeAg阳性和HBsAg/抗-HBc阳性孕妇的目前主被动免疫阻断方案疗效较差,建议HBeAg阳性和HBsAg/抗-HBc阳性且HBV DNA＞2×105 IU/mL者,需要密切观察病毒载量水平,并给予孕晚期抗病毒治疗,以降低肝损伤和母婴传播的发生风险.

摘要： 慢性HBV感染及其所致终末期肝病严重威胁着我国公民健康,HBVcccDNA是慢性乙型肝炎难以治愈和停药后容易复发的主要原因.虽然用核苷(酸)类似物治疗慢性乙型肝炎可有效降低肝细胞和血清HBV DNA水平,但其载量的下降不能判断cccDNA是否被清除,也无法预测是否有持续的抗病毒效果.HBV RNA由cccDNA转录产生,近年来已被用作监测病毒是否持续存在、病毒转录活性以及肝病的进展.本综述旨在总结血清HBV RNA的特征,及其在慢性乙型肝炎临床管理中的应用.

摘要： 目的 构建人IL-2与HBsAg融合基因并转化到BCG中构建重组BCG(recombinant BCG,rBCG),为制备治疗和预防乙型肝炎和结核病的二联疫苗奠定基础.方法 以IL-2 pMalLP质粒和HBsAg pMalLP质粒为模板,设计引物,利用PCR技术扩增HBsAg和IL-2基因,进行重叠PCR获得融合基因IL-2-HBsAg并纯化,将融合基因克隆至穿梭表达载体pMV261得到重组质粒,电转化导入BCG感受态细胞,以蛋白质印迹法检测融合基因在rBCG中的表达.结果 PCR扩增得到JL-2和HBsAg,通过重叠PCR获得IL-2-HBsAg融合基因后成功插入穿梭表达载体,rBCG能表达融合蛋白.结论 构建人IL-2与HBsAg融合基因重组质粒并导人BCG,获得了稳定表达融合蛋白的rBCG.

摘要： 纳米孔检测技术是一种新型传感技术,目前被广泛应用于各种生物分子的检测.随着各种传染病大流行与局部暴发,人类对病原体检测设备的要求日益增高.基于纳米孔检测设备灵敏、实时和便携的特点,许多研究团队将其应用到传染病病原体的快速检测,并取得了丰硕的成果.现介绍近年来纳米孔检测技术在人类免疫缺陷病毒、乙型肝炎病毒、流行性感冒病毒和埃博拉病毒这几种常见传染病病原体检测中的应用,并对其发展态势进行总结,以期为传染病病原体的快速检测提供新的研究思路.

摘要： 目的 了解强制泛素化乙型肝炎核心抗原(ubiquitination of hepatitis B virus core antigen,Ub-HBcAg)对树突状细胞(dendritic cell,DC)自噬的影响,以及调节细胞自噬对DC抗原提呈功能和细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)反应的作用.方法 构建Ub-HBcAg慢病毒载体(lentiviral vector,LV,即为LV-Ub-HBcAg组)、无泛素化的乙型肝炎核心抗原(hepatitis B virus core antigen,HBcAg)重组慢病毒载体(LV-HBcAg组)和空载质粒慢病毒载体(LV组),并分别转染至DC2.4细胞,设置空白对照组(NC组).采用蛋白质印迹法检测自噬相关蛋白P62、微管相关蛋白1轻链3B(microtubuleassociated protein 1 light chain 3 beta,LC3B)、自噬相关蛋白5(autophagy related 5,ATG5)和自噬效应蛋白1(Beclin-1)的蛋白质相对表达量.流式细胞术检测DC表面共刺激分子CD86、CD80、主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)-Ⅱ的表达.CCK-8法检测T淋巴细胞增殖.非放射性的乳酸脱氢酶释放实验检测特异性CTL杀伤活性.统计学分析采用独立样本t检验.结果 NC组自噬相关蛋白LC3B-Ⅱ/LC3B-I、Beclin-1和ATG5蛋白质相对表达量分别为0.445±0.076、0.522±0.026、0.761±0.038,分别低于LV-Ub-HBcAg组的0.926±0.021、0.919±0.016、1.451±0.028,而NC组P62相对表达量为1.875±0.016,高于LV-Ub-HBcAg组的0.647±0.121,差异均有统计学意义(t=6.102、9.842、17.490、10.590,均P＜0.01).LV-Ub-HBcAg组DC的表面共刺激分子CD86 (75.51％)、CD80(83.35％)和MHC-Ⅱ(66.66％)的表达也较高,NC组分别为8.03％、7.49％、0.04％.LV-Ub-HBcAg组特异性CTL杀伤率为(65.310±2.091)％,高于NC组的(14.400±0.497)％和LV-HBcAg组的(54.870±1.443)％,差异均有统计学意义(t=23.690、4.111,均P＜0.05).结论 Ub-HBcAg可促进DC自噬,并上调DC表面共刺激分子的表达,有利于DC成熟活化,并在泛素化作用下能更有效地激活T淋巴细胞功能,产生强烈的特异性CTL反应.

摘要： 2018年10月欧洲肝脏研究协会组织专家在意大利陶尔米纳举行了一个专门针对隐匿性乙型肝炎病毒感染(occult hepatitis B virus infection,OBI)的研讨会,回顾现有的关于OBI的知识,确定需要进一步研究的问题,并突出现有的争议和新出现的观点,对2008年的共识意见进行了更新.

摘要： 目的 分析北京市人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者/艾滋病(AIDS)患者合并乙型肝炎病毒(HBV)感染的流行病学特征,并探索影响合并感染的相关因素.方法 对北京地区HIV/AIDS定点治疗医院(北京协和医院、北京地坛医院、北京佑安医院)长期随访的接受抗反转录病毒治疗(ART)的13 253例HIV感染者临床资料进行回顾性分析.结果 排除未进行HBV标志物检测的患者1 681例,共有11 572例HIV感染者纳入研究,其中HIV合并HBV感染的患者532例(4.6％),主要为青壮年(28～48岁)男性,占85.9％,感染途径以同性性传播为主(74.8％).87.4％的合并感染患者基线治疗接受了包含拉米夫定(3TC)、替诺福韦(TDF)两种抗HBV药物的治疗.2013-2018年,HIV合并HBV感染的年新增感染率呈波动性下降的趋势,年均增长率分别为6.37％、4.55％、3.92％、4.68％、4.24％和2.74％.HIV合并HBV感染的主要影响因素为年龄(28 ～48岁比＜28岁,OR=2.807,95％CI 1.241～6.345)以及婚姻状况(已婚比未婚,OR=1.259,95％CI 1.004～1.579).结论 北京地区HIV合并HBV感染率为4.6％;2013-2018年HIV合并HBV的年新增合并感染率呈下降趋势.青壮年(28～48岁)已婚HIV感染者合并HBV感染的风险较高.

摘要： 目的 探讨乙型肝炎病毒(HBV)感染与脊柱内固定术后深部感染的相关性及病原菌分析.方法 选取2013年1月至2019年1月湖北省孝感市第一人民医院行脊柱内固定术且伴随HBV感染的患者184例作为HBV感染组,选取同期行脊柱内固定术的非HBV感染患者184例作为非HBV感染组.比较两组患者术后深部感染发生情况及其病原菌分布情况,采取单因素分析和多因素Logistics回归分析法分析HBV感染患者术后发生深部感染、HBV再激活的影响因素.结果HBV感染组患者术后深部感染发生率显著高于非HBV感染组[19.57％(36/184)比9.24％(17/184)],差异有统计学意义(P＜0.01).两组患者术后深部感染的病原菌均以鲍氏不动杆菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌为主,病原菌分布情况比较差异无统计学意义(P＞0.05).年龄≥65岁、手术时间≥3 h、术中出血量≥1 000 ml、CD4+/CD8+＜1.4、总淋巴细胞计数＜0.7×109/L、术前肝功能异常[天冬氨酸氨基转移酶(AST)＞40 U/L或丙氨酸氨基转移酶(ALT)＞50 U/L]、术前HBV-DNA(+)的HBV感染患者术后深部感染发生率均显著升高[27.16％(22/81)比 13.59％(14/103)、28.77％(21/73)比 13.51％(15/111)、31.15％(19/61)比 13.82％(17/123)、29.69％(19/64)比 14.17％(17/120)、27.78％(20/72)比 14.29％(16/112)、7/18比 17.47％(29/166)、30.43％(21/69)比 13.04％(15/115)],差异均有统计学意义(P＜0.05或＜0.01).多因素Logistic回归分析结果显示,术中出血量(≥1 000 ml)、CD4+/CD8+(＜1.4)、总淋巴细胞计数(＜0.7×109/L)、术前HBV-DNA(+)是HBV感染患者脊柱内固定术后深部感染的独立危险因素(P＜0.01或＜0.05).年龄≥65岁、手术时间≥3 h、术中出血量≥1 000 ml、术前肝功能异常、术前HBV-DNA(+)、术后深部感染患者HBV再激活发生率显著升高[(33.33％(27/81)比18.45％(19/103)、34.25％(25/73)比 18.92％(21/111)、34.43％(21/61)比20.33％(25/123)、8/18比22.89％(38/166)、34.78％(24/69)比 19.13％(22/115)、41.67％(15/36)比20.95％(31/148)],差异均有统计学意义(P＜0.05).多因素Logistic回归分析结果显示,术中出血量(≥1 000ml)、术前HBV-DNA(+)、术后深部感染是HBV感染患者HBV再激活的独立危险因素(P＜0.05或＜0.01).结论 HBV感染显著增加脊柱固定术后深部感染发生率,其独立危险因素为术中出血量(≥1 000ml)、CD4+/CD8+(＜1.4)、总淋巴细胞计数(＜0.7×109/L)、术前HBV-DNA(+).脊柱内固定术可引起HBV再激活,其独立危险因素为术中出血量(≥1 000 ml)、术前HBV-DNA(+)、术后深部感染.

摘要： 目的 了解乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)合并人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染对抗反转录病毒治疗(anti-retroviral therapy,ART)效果的影响.方法 纳入2016年9月至2019年10月重庆市公共卫生医疗救治中心收治的269例HIV感染者,将其分为HIV单独感染组和HBV合并HIV感染组,比较2组患者ART启动时和ART后不同时间点(2、4、8、12、24、36、48和96周)的肝功能、CD4+T淋巴细胞计数、HIV RNA变化情况.统计学分析采用独立样本t检验、秩和检验和x2检验.结果 HIV单独感染组145例,HBV合并HIV感染组124例.ART启动时两组患者肝功能指标[天冬氨酸转氨酶(t =9.566)、丙氨酸转氨酶(t=-4.652)、总胆红素(t=-25.476)]差异均无统计学意义(均P ＞0.05).ART后24、48和96周时,HIV单独感染组与HBV合并HIV感染组CD4+T淋巴细胞计数分别为(305.9±156.9)/μL比(266.2±172.5)/μL、(388.5±226.1)/μL比(380.8±287.4)/μL、(369.5±191.4)/μL比(453.6±179.6)/μL;ART后48、72和96周时,CD4+T淋巴细胞计数增长值为121.0(-52.5,144.5)/μL比156.0(-35.8,185.8)/μL、139.0(-116.0,176.8)/μL比114.5(-59.5,229.0)/μL、-91.0(-110.0, 153.3)/μL比-94.0(-130.8,114.3)/μL,差异均无统计学意义(t=-0.516、-0.066、-1.414、Z=-1.715、-0.802、-1.602,均P＞0.05).ART后24、48和96周时,HIV单独感染组的HIV RNA抑制率分别为89.7％(130/145)、96.6％(140/145)和96.6％ (140/145),HBV合并HIV感染组分别为87.1％ (108/124) 、92.7％(115/124)和94.4％ (117/124),差异均无统计学意义(x2=0.026、0.053、0.017,均P＞0.05).ART后第2周、第4周HIV单独感染组肝功能异常率分别为3.4％ (5/145)、6.2％ (9/145),低于HBV合并HIV感染组的21.0％ (26/124)、13.7％ (17/124),差异均有统计学意义(x2=20.121、4.309,均P＜0.05);而第8周[10.3％(15/145)比9.7％(12/124)]、第12周[9.0％(13/145)比9.7％ (12/124)]、第24周[9.7％ (14/145)比8.9％(11/124)]、第36周[9.7％ (14/145)比10.5％ (13/124)]、第48周[8.3％ (12/145)比8.1％ (10/124)]、第96周[2.8％ (4/145)比0(0/124)]的肝功能异常率差异均无统计学意义(x2=0.330、0.040、0.049、0.051、0.004、3.472,均P＞0.05).结论 合并HBV感染对HIV感染者的ART效果无不良影响.

摘要： 本发明涉及一种乙型肝炎病毒表面抗原特定的表位，和用于中和乙型肝炎病毒的、与该表位结合的结合分子。由于本发明所提供的表位是通过形成三维结构而产生的并且不包括a决定簇，通过该a决定簇诱导针对现有疫苗或HBIg给药的逃逸突变，所以包括与该表位结合的抗体的组合物或包括该表位的疫苗组合物发生由于逃逸突变而功效降低的可能性非常低。因此，这样的抗体或疫苗组合物在预防和/或治疗HBV中非常有效。

摘要： 本发明涉及一种同步检测乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、人免疫缺陷病毒的荧光定量PCR试剂盒。所述试剂盒包含HBV、HCV和HIV‑1的检测引物和探针，所述引物和探针的序列如SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.9所示。本发明提供的试剂盒采用多重荧光PCR方法，能够实现DNA病毒HBV以及RNA病毒HCV和HIV‑1的同时检测，且一种病毒核酸的扩增不会对其他两种产生影响，具有灵敏度高、特异性强、重复性好、检测时间短、检测成本低、操作技术要求低和不易污染等优点，对于血液中心或血站进行献血者的HBV、HCV和HIV‑1三种病毒的同时检测具有重要的意义和较高的应用价值。

摘要： 本发明属于生物技术检测领域，具体涉及一种人免疫缺陷病毒（HIV）、乙型肝炎病毒（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV）快速联检试剂盒及其制备和应用。本发明所述试剂盒中包括HIV检测引物及探针、HBV检测引物及探针、HCV检测引物及探针，使用多重荧光PCR技术，在单个PCR反应管中同时检测HIV,HBV,HCV三种病毒核酸，检测灵敏度高，特异性好，人工误差率低，实验耗时短；在扩增反应过程中对荧光信号进行实时检测，全程封闭进行，降低了样本间交叉污染的风险，适合在大规模血液筛查和临床检验中应用。

摘要： 乙型肝炎病毒(HBV)疫苗包括以纳米复合物配制的HBV核心抗原(HBcAg)和/或HBV表面抗原(HBsAg)。纳米复合物含有壳聚糖和γ‑PGA。这些含有HBc/sAg、壳聚糖和γ‑PGA的纳米复合物可以诱导比具有明矾佐剂的常规疫苗更平衡的T辅助细胞(Th1和Th2)极化。本发明的HBc/s‑NC可引起高水平的抗HBsAg抗体，快速消除HBsAg，并且HBeAg缓慢下降，表明存在HBsAg血清转换现象。因此，HBc/s‑NC可以克服慢性HBV感染引起的免疫耐受，重新建立宿主免疫，从而实现功能性治愈。

摘要： 本发明涉及一种乙型肝炎病毒表面抗原特定的表位，和用于中和乙型肝炎病毒的、与该表位结合的结合分子。由于本发明所提供的表位是通过形成三维结构而产生的并且不包括a决定簇，通过该a决定簇诱导针对现有疫苗或HBIg给药的逃逸突变，所以包括与该表位结合的抗体的组合物或包括该表位的疫苗组合物发生由于逃逸突变而功效降低的可能性非常低。因此，这样的抗体或疫苗组合物在预防和/或治疗HBV中非常有效。

摘要： 本发明提供了检测乙型肝炎病毒的抗药性株系的方法，其包括使用引物组通过LAMP扩增样品溶液中的乙型肝炎病毒核酸以产生扩增产物，然后将扩增产物与含有来源于抗药性株系的多核苷酸的探针和/或含有来源于非抗药性株系的多核苷酸的探针杂交，以检测乙型肝炎病毒的抗药性株系。

摘要： 本发明提供了检测乙型肝炎病毒的抗药性株系的方法，其包括使用引物组通过LAMP扩增样品溶液中的乙型肝炎病毒核酸以产生扩增产物，然后将扩增产物与含有来源于抗药性株系的多核苷酸的探针和/或含有来源于非抗药性株系的多核苷酸的探针杂交，以检测乙型肝炎病毒的抗药性株系。

摘要： 本发明提供针对乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原(HBsAg)的人抗体的用途。所述抗体显示优异的中和HBV能力，因此，可以用于预防或治疗HBV感染或由此引起的疾病。

摘要： 本发明涉及一种同步检测乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、人免疫缺陷病毒的荧光定量PCR试剂盒。所述试剂盒包含HBV、HCV和HIV‑1的检测引物和探针，所述引物和探针的序列如SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.9所示。本发明提供的试剂盒采用多重荧光PCR方法，能够实现DNA病毒HBV以及RNA病毒HCV和HIV‑1的同时检测，且一种病毒核酸的扩增不会对其他两种产生影响，具有灵敏度高、特异性强、重复性好、检测时间短、检测成本低、操作技术要求低和不易污染等优点，对于血液中心或血站进行献血者的HBV、HCV和HIV‑1三种病毒的同时检测具有重要的意义和较高的应用价值。

摘要： 本发明属于生物技术检测领域，具体涉及一种人免疫缺陷病毒（HIV）、乙型肝炎病毒（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV）快速联检试剂盒及其制备和应用。本发明所述试剂盒中包括HIV检测引物及探针、HBV检测引物及探针、HCV检测引物及探针，使用多重荧光PCR技术，在单个PCR反应管中同时检测HIV,HBV,HCV三种病毒核酸，检测灵敏度高，特异性好，人工误差率低，实验耗时短；在扩增反应过程中对荧光信号进行实时检测，全程封闭进行，降低了样本间交叉污染的风险，适合在大规模血液筛查和临床检验中应用。