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甲氨蝶呤对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞表达RANKL的影响

摘要

目的探讨类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)滑膜细胞中表达核因子κB受体活化子配体(RANKL)的细胞以及甲氨蝶呤(MTX)对其表达的影响.方法收集原代RA及正常滑膜细胞,用免疫磁珠法筛选滑膜CD68+和CD68-细胞,CD44免疫组织化学染色观察以及RANKL免疫荧光检测;细胞体外培养并在培养液中加入最终浓度为1 mg/L的MTX,用双夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)检测培养液中RANKL含量以及评估每一细胞RANKL表达量.结果在滑膜细胞中,CD68+滑膜细胞为巨噬样细胞,CD44、RANKL染色阴性;CD68-滑膜细胞为纤维样细胞,CD44、RANKL染色阳性.RA滑膜CD44+/CD68-纤维样细胞RANKL蛋白表达量显著增高,MTX对其RANKL表达有抑制作用(P<0.01).正常滑膜纤维样细胞低表达RANKL,MTX对其RANKL表达抑制作用来自对细胞增殖的抑制.结论滑膜组织中有RANKL表达,这些细胞为CD44+/CD68-纤维样细胞,RA滑膜纤维样细胞RANKL分泌增高并受到MTX抑制.MTX可通过抑制RANKL减少关节周围骨破坏作用.

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