阳离子脂质体介导增强型绿色荧光蛋白质粒转染骨骼肌卫星细胞

许志锋; 李敬来; 韩振; 冯钢; 任明明

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阳离子脂质体介导增强型绿色荧光蛋白质粒转染骨骼肌卫星细胞

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背景：骨骼肌卫星细胞是一种具有多向分化能力的全能干细胞,存在于骨骼肌间质中,对缺血、缺氧有一定的耐受力,是干细胞工程中重要来源细胞。目的：为联合基因工程细胞心肌成形治疗初步探讨较为简便、经济的骨骼肌卫星细胞体外培养方法,建立一种简单、高效的转染骨骼肌卫星细胞的方法及探讨转染后基因表达的特点。方法：分离、培养兔大腿骨骼肌卫星细胞,用CKK-8法测定其生长曲线。根据质粒和脂质体不同比例分组,用脂质体介导增强型绿色荧光蛋白质粒（plasmid enhanced green fluorescent protein,pEGFP）转染骨骼肌卫星细胞。测定各组转染效率及目标基因表达特点。结果与结论：成功分离培养骨骼肌卫星细胞及转染pEFGF。在合适的质粒和脂质体比例下,转染效率可达35%以上。目标蛋白在转染12 h内开始表达,48-72 h表达最强,1周后逐渐减弱,2周后仍可观察到其表达。阳离子脂质体可介导pEGFP高效转染骨骼肌卫星细胞,转染效率与质粒、脂质体比例密切相关,目标基因表达随时间改变。

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来源
《中国组织工程研究》 |2013年第46期|P.8056-8061|共6页
作者
许志锋; 李敬来; 韩振; 冯钢; 任明明;
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作者单位

北京大学深圳医院心血管外科,广东省深圳市518036;

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正文语种 CHI
中图分类生物医学工程;
关键词
组织构建; 组织构建细胞学实验; 骨骼肌卫星细胞; 骨骼肌干细胞; 绿色荧光蛋白; 质粒; 阳离子脂质体; 转染;

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