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首页> 中文期刊> 《中国组织工程研究》 >温敏型壳聚糖载体中体外诱导的神经元样细胞生长的观察

温敏型壳聚糖载体中体外诱导的神经元样细胞生长的观察

         
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目的:为验证温敏型可注射性水凝胶壳聚糖-甘油磷酸钠(chitosan/glycerophosphate,C/GP)作为神经支架的可行性,将体外诱导的神经元样细胞与温敏型C/GP凝胶共培养,观察其生物相容性。方法:实验于2006-03/12在白求恩国际和平医院实验室完成。①实验材料:壳聚糖由浙江金壳生物化学有限公司提供,β-甘油磷酸钠由FlukaAG公司提供。②实验方法:脱乙酰度91%的壳聚糖200mg溶于9mLHCl溶液中,甘油磷酸钠560mg溶于1mL去离子水中,消毒后室温下按2∶体积比将甘油磷酸钠溶液加入壳聚糖溶液中制备温敏型水凝胶3C/GP。实验分为3组:由骨髓基质细胞诱导分化的神经元样细胞与C/GP复合物共培养者为实验组;神经元样细胞与完全培养基共培养者为细胞对照组;C/GP复合物加完全培养基共培养者为C/GP对照组。③观察指标:光镜下观察各组细胞形态变化,各组在培养24h后MTT法酶标仪测吸光度(A值),连续观察7d绘制生长曲线。结果:神经元样细胞在C/GP凝胶呈三维分布,胞体变大,逐渐伸出突起,呈单极、双极或多极,部分相邻细胞的突起连接。神经元样细胞的生长曲线为"S"型,第1,2天为潜伏期,第3～5天为对数生长期,6d后细胞数量开始减少,实验组的A值较细胞对照组略低,两组在7d后A值均有所降低,但各个时间点差异均无显著性意义(P>0.05)。结论:神经元样细胞与C/GP凝胶有良好的生物相容性,温敏型可注射性C/GP凝胶能作为神经工程的载体材料。

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