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冷适应嘌呤核苷磷酸化酶温敏型高效表达载体的构建及在大肠杆菌中的热诱导表达

摘要

目的:构建冷适应嘌呤核苷磷酸化酶(XmPNP)重组蛋白温敏型高效表达载体,热诱导XmPNP在大肠杆菌中表达。方法:经PCR从重组子pXMH上克隆XmPNP编码基因deoD,构建XmPNP重组蛋白温敏型高效表达工程菌,热诱导表达重组蛋白.结果:在工程菌Ecoli.DH5 a(pBV-XmPNP)热诱导全菌蛋白中检测到相对分子质量大小约为25×103kDa的XmPNP重组蛋白.结论:XmPNP温敏型工程菌的成功构建为进一步研究微生物产酶发酵和酶法生产核苷类抗病毒药物利巴韦林奠定了一定的物质基础.

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