大肠杆菌嘌呤核苷磷酸化酶基因的克隆与真核表达载体的构建

谢庆军; 陆应麟; 刘爽; 王涛

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大肠杆菌嘌呤核苷磷酸化酶基因的克隆与真核表达载体的构建

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根据Ｇｅｎｂａｎｋ中大肠杆菌嘌呤核苷磷酸化酶（ＰＮＰ）基因的核苷酸序列，设计并合成了一对引物，以大肠杆菌基因组ＤＮＡ为模板，进行ＰＣＲ扩增，并将扩增产物定向连接到克隆、测序及真核表达载体ＰＣＤＮＡ３中，进行酶切鉴定、测序及序列分析。结果表明ＰＣＲ扩增出７４１ｂｐ大小的片段，通过酶切和序列分析证明含完整的ＰＮＰ基因序列且基因插入方向正确，此序列与文献报道的ＰＮＰ基因的同源性为９９．７％。说明克隆的ＰＮＰ基因与文献报道的基本一致，ｐｃＤＮＡ３－ＰＮＰ的构建成功为今后用其进行基因转染来研究ＰＮＰ／Ｍｅｐ－ｄＲ自杀基因系统在肿瘤基因治疗中的应用打下了基础。

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来源
《生物技术通讯》 |1999年第4期|241-245|共5页
作者
谢庆军; 陆应麟; 刘爽; 王涛;
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作者单位

军事医学科学院基础医学研究所;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类转化及克隆;
关键词
大肠杆菌嘌呤核苷磷酸化酶; 自杀基因; 分子克隆;

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