以ECHO克隆系统构建人生长激素的哺乳动物表达载体

汪宗桂; 郑文岭; 马文丽; 梁念慈

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以ECHO克隆系统构建人生长激素的哺乳动物表达载体

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目的:构建ECHO克隆系统构建人生长激素的哺乳动物表达载体,以克服原核生物表达系统生产人生长激素存在的缺陷。方法:实验于2002-08在解放军广州军区广州总医院医学实验科进行。①先把人生长激素基因片段克隆到ECHO系统的供载体中,构建供载体pUni/Lox-HGH。②让该供载体与具Lox位点的受载体在Cre重组酶的作用下融合,构建出人生长激素的哺乳动物表达载体pcDNA4.1/pUni-HGH,使人生长激素基因处于CMV启动子的调控下,EcoRI单酶切及BamHI/EcoRI双酶切鉴定重组质粒。结果:由琼脂糖凝胶电泳和序列测定证实,用ECHO克隆系统构建的融合质粒中,确实含有人生长激素带内含子的基因序列。结论:用ECHO克隆系统可以构建人生长激素的哺乳动物表达载体,且方便、快捷,为取代原核生物表达系统生产人生长激素,提供了依据。

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来源
《中国组织工程研究》 |2006年第20期|110-112|共3页
作者
汪宗桂; 郑文岭; 马文丽; 梁念慈;
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作者单位

广东医学院生物化学教研室;

华南基因组研究中心;

南方医科大学基因工程研究所;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类医学遗传工程;
关键词
人生长激素; 遗传载体; 电泳; 琼脂凝胶;

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