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小鼠髓核特异性标志物的鉴定和表达分析

         

摘要

背景:椎间盘退变是下腰痛的主要诱因,而髓核细胞在椎间盘退变中起着至关重要的作用.小鼠模型是研究椎间盘稳态和退变的重要动物模型,然而对小鼠髓核特异性标志物目前还缺乏较为系统的分析.目的:验证细胞角蛋白19、葡萄糖转运蛋白1和磷脂酰肌醇蛋白聚糖3这3种蛋白在不同时期小鼠椎间盘内的表达情况及其细胞特异性;探讨上述蛋白作为小鼠髓核特异性标志物的可行性.方法:10只6周龄C57BL/6雄性小鼠随机分为2月龄组及12月龄组(n=5),分别饲养至相应月龄时收取椎间盘样本进行后续分析.采用苏木精-伊红染色和番红固绿染色评估椎间盘组织学完整形态;利用免疫荧光或免疫组化染色检测细胞角蛋白19、葡萄糖转运蛋白1和磷脂酰肌醇蛋白聚糖3这3种蛋白在两组小鼠椎间盘冠状位切片上的表达情况,并通过统计学方法分析各蛋白在不同年龄小鼠椎间盘中的表达变化.结果 与结论:①在2月龄小鼠椎间盘内,上述3种标志物均可明显区分髓核与其他组织;②在12月龄老年小鼠椎间盘内,只有细胞角蛋白19仍旧特异性表达于髓核组织,而葡萄糖转运蛋白1和磷脂酰肌醇蛋白聚糖3除在髓核细胞表达外,在软骨终板的钙化处亦有出现;③提示细胞角蛋白19、葡萄糖转运蛋白1和磷脂酰肌醇蛋白聚糖3均在小鼠髓核细胞表达,其中细胞角蛋白19可作为年轻及老龄小鼠的髓核特异性标志物.

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