猪传染性胃肠炎病毒S基因B、C位点的克隆与表达及间接ELISA方法的建立

尹杰; 杨恒; 曹三杰; 黄小波; 文心田; 李洁萍; 余正强; 周军

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针对猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S基因B、C抗原位点编码基因片段(SBC,下同)设计合成1对引物,用PCR方法扩增SBC基因,将该基因片段定向插入到原核表达载体pET-32a(+)中,构建原核表达载体pET-32a-SBC.阳性质粒转化宿主菌BL21(DE3),在IPTG的诱导下表达大小约38 kD的蛋白,重组蛋白以包涵体的形式存在.Western blot分析表明,表达产物具有良好的免疫学活性.以纯化的表达产物作为诊断抗原建立了检测TGEV抗体的间接ELISA (TGEV SBC-ELISA)方法.表明建立的间接ELISA方法特异性和重复性良好,敏感性比血清中和试验高,可用于TGEV的检疫和流行病学调查.

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来源
《中国兽医杂志》 |2015年第1期|7-10|共4页
作者
尹杰; 杨恒; 曹三杰; 黄小波; 文心田; 李洁萍; 余正强; 周军;
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作者单位

四川省遂宁市畜牧食品局,四川遂宁629000;

四川农业大学动物医学院动物传染病与基因芯片实验室/动物疫病与人类健康四川省重点实验室,四川雅安625014;

四川农业大学动物医学院动物传染病与基因芯片实验室/动物疫病与人类健康四川省重点实验室,四川雅安625014;

四川农业大学动物医学院动物传染病与基因芯片实验室/动物疫病与人类健康四川省重点实验室,四川雅安625014;

四川农业大学动物医学院动物传染病与基因芯片实验室/动物疫病与人类健康四川省重点实验室,四川雅安625014;

四川农业大学动物医学院动物传染病与基因芯片实验室/动物疫病与人类健康四川省重点实验室,四川雅安625014;

四川省遂宁市船山区畜牧食品局,四川遂宁629000;

四川省遂宁市船山区畜牧食品局,四川遂宁629000;

四川省遂宁市船山区畜牧食品局,四川遂宁629000;

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正文语种 chi
中图分类猪;
关键词
猪传染性胃肠炎病毒; 克隆与表达; ELISA; 诊断;

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