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TGEVS基因A和B/C抗原位点间接ELISA方法的建立及血清学的初步调查

摘要

为建立猪传染性胃肠炎病毒与猪呼吸道冠状病毒的鉴别诊断方法,分别利用构建的基因工程重组菌表达了TGEV S基因A和B/C位点蛋白。以纯化的蛋白作为包被原分别建立了间接ELISA方法,确定了方法的最佳反应条件,并用所建立的方法对中国12个地区规模化养猪场的750份血清样本进行了检测。结果表明,重组A蛋白抗原的最佳包被浓度为0.01μg/mL,封闭液为5%的山羊血清,待检血清的稀释度为1:100;重组B/C位点的最佳包被浓度为0.03μg/mL,封闭液为1%的BSA,待检血清的稀释度为1:100。血清学调查显示,A位点抗体阳性率平均为93.1%,A位点阳性,但B/C位点阴性的为2.5%,由此表明,中国有些地区的猪场存在B/C位点缺失的TGEV毒株。

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