猪圆环病毒2型CC株ORF3基因序列分析及真核表达

黄文明; 徐廷川; 张亮权; 张得玉; 张民泽; 张桂红

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猪圆环病毒2型CC株ORF3基因序列分析及真核表达

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根据GenBank中猪圆环病毒2型(PCV2)的核酸序列,设计了1对引物,采用PCR方法从疑似断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的死亡仔猪病料中扩增出了ORF3基因,将其克隆到高效真核表达载体pEGFP- N2中,筛选出含有ORF3基因的重组质粒,命名为pEGFP-N2-ORF3.对此重组质粒进行测序分析,结果表明,克隆的ORF3基因与其他PCV2的ORF3核苷酸序列相似性为96.2％-99.0％,氨基酸序列同源性为90.5 ％～98.1％.将重组质粒纯化后转染COS-7细胞,用PCR方法扩增出了特征性的基因片段,并采用特异性单抗进行间接免疫荧光,结果转染pEGFP- N2-ORF3重组蛋白在细胞核和细胞浆中均有表达,尤其在细胞核中表达量较高,且对细胞有一定的毒性.本研究为进一步探讨ORF3的结构和功能提供理论依据.

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来源
《中国兽医杂志》 |2012年第5期|29-32|共4页
作者
黄文明; 徐廷川; 张亮权; 张得玉; 张民泽; 张桂红;
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作者单位

华南农业大学兽医学院,广东广州510642;

华南农业大学兽医学院,广东广州510642;

华南农业大学兽医学院,广东广州510642;

华南农业大学兽医学院,广东广州510642;

华南农业大学兽医学院,广东广州510642;

华南农业大学兽医学院,广东广州510642;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类单股DNA病毒;
关键词
圆环病毒2型; ORF3; 序列分析; 真核表达;

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