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抗鸡传染性支气管炎病毒单克隆抗体的制备及其特性的研究

         

摘要

本实验将鸡传染性支气管炎病毒(澳大利亚T株)进行纯化,制成抗原,应用杂交瘤技术建立了5株分泌抗鸡传染性支气管炎病毒的杂交瘤细胞株,其免疫球蛋白的亚类分别属于IgG1、IgG3、IgM.杂交瘤细胞分泌抗体的能力稳定,长期传代对其抗体分泌能力没有影响.5株单克隆抗体与其它12株鸡传染性支气管炎病毒标准株之间存在不同程度的交叉反应,但对鸡新城疫病毒、传染性法氏囊病病毒、产蛋下降综合征病毒及禽流感病毒均无交叉反应.用此杂交瘤细胞制备腹水的ELISA效价为10-6~10-7,抗体对热的稳定性有一定的差别.抗体纯化后,经SDS-PAGE凝胶电泳表明具有单克隆抗体的特征,经快速蛋白分析鉴定其纯度为89.49%.竞争ELISA法证明其中4株的单抗与抗原结合位点并不完全相同.采用单抗夹心ELISA法,对抗原的检测方法进行了初步探索.

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