蓝舌病病毒血清8型NS3蛋白在昆虫杆状病毒系统中的表达与鉴定

黄超华; 花群义; 曹琛福; 阮周曦; 史卫军; 林彦星; 曾少灵; 刘建利; 王潇; 陈金顶

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为表达蓝舌病病毒NS3蛋白,将蓝舌病病毒血清8型NS3序列克隆至pFastBac-HTA载体上,经转座、转染后获得重组杆状病毒rBac-NS3;用间接免疫荧光(IFA)检测NS3蛋白的表达情况,并采用亲和层析进行纯化;以Western Blot和间接ELISA方法鉴定NS3蛋白的反应原性.IFA结果显示,重组杆状病毒rBac-NS3感染的Sf9细胞可以大量表达NS3蛋白.Western Blot结果显示,纯化后的NS3蛋白与抗His单抗和绵羊蓝舌病阳性血清能够发生特异性反应;以纯化的NS3蛋白为包被抗原建立的间接ELISA方法可以区分蓝舌病阳性血清和阴性血清,进一步验证本试验利用杆状病毒表达系统成功表达并纯化出蓝舌病病毒NS3蛋白,表明纯化后的NS3蛋白具有良好的反应原性,可作为开发鉴别诊断试剂盒的备选蛋白及NS3蛋白的结构和生物学功能研究.

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来源
《中国兽医杂志》 |2020年第4期|1-410中插1|共6页
作者
黄超华; 花群义; 曹琛福; 阮周曦; 史卫军; 林彦星; 曾少灵; 刘建利; 王潇; 陈金顶;
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作者单位

华南农业大学兽医学院广东广州510642;

深圳海关动植物检验检疫技术中心广东深圳518045;

深圳海关动植物检验检疫技术中心广东深圳518045;

深圳海关动植物检验检疫技术中心广东深圳518045;

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深圳海关动植物检验检疫技术中心广东深圳518045;

深圳海关动植物检验检疫技术中心广东深圳518045;

华南农业大学兽医学院广东广州510642;

华南农业大学兽医学院广东广州510642;

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正文语种 chi
中图分类家畜病毒学;
关键词
蓝舌病病毒; 昆虫杆状病毒; NS3蛋白; 间接ELISA;

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