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鉴别口蹄疫病毒O型、A型、Asia Ⅰ型三重RT-PCR检测方法的建立

         

摘要

为建立鉴别口蹄疫病毒O型、A 型、Asia Ⅰ型的RT-PCR快速检测方法,根据GenBank中已登录的口蹄疫病毒(FMDV)O型、A型、Asia Ⅰ型高度保守的2B基因序列设计了1条共用反转录引物,根据3个血清型的VP1特异性基因序列,设计了3对型特异性引物对;以FMDV样本总RNA反转录产物为模板,建立了鉴别FMDV O、A、Asia Ⅰ型三重RT-PCR检测方法.该方法灵敏度高,最低检测限均为100拷贝/μL;重复性和稳定性好;特异性强,与其他7个对照病原核酸均呈现阴性反应;可检测出10份疑似临床样品中3个血清型的FMDV感染样品.表明本试验成功建立了鉴别FMDV 0型、A型、Asia Ⅰ型三重RT-PCR检测方法,可用于临床上FMDV 0型、A型、Asia Ⅰ型的分型鉴别检测.

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