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龙葵碱对HepG2人肝癌细胞NAT酶动力学常数的影响

         
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目的 探讨龙葵碱对HepG2细胞NAT酶米氏常数Km及最大反应速率Vmax的影响.方法 MTT法测定龙葵碱对消化系统SGC-7901人胃癌、HepG2人肝癌、Ls-174人大肠癌3种肿瘤细胞株的细胞毒作用,采用高效液相色谱(HPLC)法,以2-AF为底物,以2-AF的浓度为底物浓度,在以HepG2完整细胞及细胞质内2-AF被NAT酶乙酰化为2-AAF的速度为NAT酶的反应速率,采用双倒数作图法,以底物2-AF浓度的倒数1/S对NAT反应速率的倒数1/V作直线,得出回归方程,计算Km和Vmax.结果 MTT法测定表明龙葵碱对HepG2人肝癌细胞比较敏感,酶动力学研究表明,以2-AF为底物,对于HepG2完整细胞,阴性对照组的Km和Vmax分别为(2.37×10-3±8.37×10-5) mmol·L-1、(9.16×10-4±7.54×10-5) nmol·106 cells-1,龙葵碱组的Km和Vmax分别为(2.22×10-3±9.05×10-5) mmol·L-1和(5.14×10-4±3.72×10-5) nmol·106 cells-1.对于HepG2细胞质,阴性对照组的Km和Vmax分别为(8.95×10-3±2.61×10-4) mmol·L-1、(2.55×10-6±1.92×10-8) μmol·min-1g-1 Pro,龙葵碱组的Km和Vmax分别为(9.48×10-3±3.63×10-4) mmol·L-1和(2.43×10-6±1.32×10-8) μmol·min-1 g-1 Pro,统计学表明对于HepG2完整细胞和细胞质,阴性对照组和龙葵碱组的Km没有差异,而Vmax差异有显著性(完整细胞P<0.01,细胞质P<0.05).结论 龙葵碱是HepG2人肝癌细胞NAT酶2-AF底物的非竞争性抑制剂.

著录项

  • 来源
    《中国药理学通报》 |2008年第9期|1187-1191|共5页
  • 作者

    季宇彬; 高世勇; 汲晨锋; 邹翔;

  • 作者单位

    哈尔滨商业大学生命科学与环境科学研究中心药物研究所博士后科研工作站;

    黑龙江;

    哈尔滨150076;

    国家教育部抗肿瘤天然药物工程研究中心;

    黑龙江;

    哈尔滨150076;

    哈尔滨商业大学生命科学与环境科学研究中心药物研究所博士后科研工作站;

    黑龙江;

    哈尔滨150076;

    国家教育部抗肿瘤天然药物工程研究中心;

    黑龙江;

    哈尔滨150076;

    哈尔滨商业大学生命科学与环境科学研究中心药物研究所博士后科研工作站;

    黑龙江;

    哈尔滨150076;

    国家教育部抗肿瘤天然药物工程研究中心;

    黑龙江;

    哈尔滨150076;

    哈尔滨商业大学生命科学与环境科学研究中心药物研究所博士后科研工作站;

    黑龙江;

    哈尔滨150076;

    国家教育部抗肿瘤天然药物工程研究中心;

    黑龙江;

    哈尔滨150076;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 化学分析与鉴定;人体细胞学;酶制剂;
  • 关键词

    龙葵碱; HepG2人肝癌细胞; NAT酶; 米氏常数; 最大反应速率;

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