放射控导正反馈基因环路对肺癌wt-p53基因靶向性表达的研究

毛丽伟; 王卫东; 李德志; 陈正堂

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放射控导正反馈基因环路对肺癌wt-p53基因靶向性表达的研究

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目的构建pE6R4/p53/GFP重组质粒并检测其在人非小细胞肺癌H1299(p53-/-)细胞的辐射诱导表达.方法用嵌合型增强子E6R4取代pci-neo质粒的CMV增强子,将wt-p53cDNA全长序列、IRES2-EGFP报告基因片段构建于嵌合型增强子E6R4下游,获得pE6R4/p53/GFP重组质粒,采用脂质体法将重组质粒转染人非小细胞肺癌H1299(p53-/-)细胞;采用RT-PCR方法鉴定wt-p53基因整合情况;Western-blot方法检测不同辐射剂量8mV X线照射后,被转染细胞中wt-p53蛋白表达水平和持续时间.结果酶切和测序鉴定pE6R4/p53/GFP重组质粒构建正确;不同剂量8mV X线照射后,4Gy照射剂量时wt-p53基因表达最强,且持续时间延长.结论成功将辐射反应元件和正反馈基因环路技术相结合,实现了wt-p53基因的表达调控,为进一步研究非小细胞肺癌的放射-基因联合治疗奠定了基础.

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来源
《重庆医学》 |2007年第19期|1921-1923|共3页
作者
毛丽伟; 王卫东; 李德志; 陈正堂;
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作者单位

第三军医大学新桥医院全军肿瘤研究所,重庆,400037;

第三军医大学新桥医院全军肿瘤研究所,重庆,400037;

第三军医大学新桥医院全军肿瘤研究所,重庆,400037;

第三军医大学新桥医院全军肿瘤研究所,重庆,400037;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类肺肿瘤;肿瘤病理解剖学、组织学;
关键词
基因环路; X线; 非小细胞肺癌细胞;

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