鲤鱼肥胖基因的分子克隆及在大肠杆菌中的表达

戴汉川; 龙良启; 丁光

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鲤鱼肥胖基因的分子克隆及在大肠杆菌中的表达

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为了研究鲤鱼肥胖基因的结构特点和体外表达产物的生物学活性 ,利用RT PCR技术从鲤鱼肠系膜脂肪组织中扩增出鲤鱼肥胖基因的cDNA编码序列 ,分析表明该cDNA序列由 4 38个核苷酸组成 ,编码 14 6个氨基酸组成的多肽 ,鲤鱼肥胖基因与人、猪、鼠的相比 ,核苷酸同源性分别为 :84 %、 86 %、 95 % ;氨基酸的同源性分别为 84 %、 82 %、 96 %。构建了原核表达载体 pET 2 8a li,利用IPTG在大肠杆菌中进行了诱导表达 ,并对表达产物进行了初步纯化和生物活性检测 ,结果表明 ,鲤鱼肥胖基因在大肠杆菌中进行了高效特异性融合表达 ,融合蛋白质分子量约为 2 0kD ,经薄层扫描分析 ,目的蛋白占菌体总蛋白的 2 0 3%。表达产物经过纯化和复性能够明显抑制小鼠的摄食和生长。

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来源
《动物学报》 |2005年第1期|95-100|共6页
作者
戴汉川; 龙良启; 丁光;
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作者单位

华中农业大学水产学院淡水增养殖生物学重点实验室;

云南农业大学动物科技学院;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类基因的表达;脂肪代谢障碍;
关键词
肥胖基因; 生物学活性; 表达产物; 大肠杆菌; RT—PCR技术; 肠系膜; 核苷酸; 鲤鱼; 同源性; 利用;

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