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mTOR信号介导的自噬在褪黑素减轻心脏缺血/再灌注损伤中的作用

         

摘要

目的探讨mTOR信号介导的自噬在褪黑素(melatonin,Mel)减轻心脏缺血/再灌注损伤中的作用。方法将60只8周龄C57BL/6小鼠随机分为假手术(Sham)组、单纯褪黑素10 mg/(kg·d)处理(Mel)组、缺血/再灌注(ischemia reperfusion,I/R)组和褪黑素10 mg/(kg·d)干预I/R(Mel+I/R)组。采用冠状动脉左前降支结扎术制备心肌I/R模型,HE染色观察心肌组织形态学变化,试剂盒检测各组血清中LDH的含量,TUNEL染色检测各组细胞凋亡情况,蛋白印迹法(Western blot)检测自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)I和II、Beclin1和mTOR磷酸化的表达,免疫荧光染色法检测LC3B的表达。结果与Sham组相比,Mel组各项指标均无明显变化;I/R组心肌纤维断裂明显排列紊乱,血清中LDH含量明显增加(P<0.01),TUNEL阳性细胞明显增多(P<0.01),LC3II和Beclin1表达显著升高(P<0.01),而磷酸化mTOR的表达降低(P<0.01),免疫荧光结果显示LC3B表达增加(P<0.01);Mel+I/R组可明显减轻心肌纤维的断裂,降低血清中LDH含量(P<0.01),减少TUNEL阳性细胞数(P<0.01),减少LC3II和Beclin1的表达(P<0.01),降低免疫荧光染色中LC3B的表达(P<0.01)。结论褪黑素通过调节mTOR信号介导的自噬减轻心脏I/R损伤。

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