抗SIRPα单克隆抗体的制备及其体外活性

赵丽丽; 赵文鹏; 许永亮; 张贵民; 曹宇; 刘忠

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抗SIRPα单克隆抗体的制备及其体外活性

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利用分子生物学技术构建可表达带有小鼠抗体Fc端(mFc)的信号调节蛋白α(SIRPα)的质粒,并转染至中国仓鼠卵巢癌细胞(CHO细胞)中来制备SIRPα-mFc蛋白。将获得的SIRPα-mFc蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠,并将免疫后的小鼠脾脏细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合。经过酶联免疫吸附反应(ELISA)和流式细胞仪的多轮筛选后,得到7株靶向SIRPα的单克隆抗体。其中,40F3和57B10这2株单克隆抗体结合活性较高,半数效应浓度(EC_(50))分别为5.866、5.457ng/mL;半数抑制浓度(IC_(50))分别为65.31、63.29 ng/mL,均优于商业化抗体SE5A5(抗SIRPα/β抗体,EC_(50)为22.47 ng/mL,IC_(50)为121.2 ng/mL)。并且,这2株抗体的亲和力数量级在1×10^(–11)且不与SIRPg结合,为后续的抗体人源化以及临床前研究提供了参考。

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来源
《中国医药工业杂志》 |2023年第3期|366-373|共8页
作者
赵丽丽; 赵文鹏; 许永亮; 张贵民; 曹宇; 刘忠;
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作者单位

山东新时代药业有限公司;

山东临沂273400;

哺乳动物细胞高效表达国家工程实验室;

山东临沂273400;

沈阳药科大学;

辽宁沈阳110016;

鲁南制药集团股份有限公司;

山东临沂276000;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类免疫学技术、设备及实验方法;
关键词
信号调节蛋白α(SIRPα); 单克隆抗体; 抗体亲和力; 制备; 体外活性;

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