RNAi沉默HIF-1α基因抑制滋养细胞TGF-3β表达的实验研究

吴维光; 陈亚琼; 曹秀琴

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目的构建缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α)基因的短发夹状干扰RNA(short hair-pin RNA,shRNA)表达质粒,探讨其在低氧条件下对BeWo细胞转化生长因子3β(transforming growth factor3β,TGF-3β)基因表达的抑制作用。方法根据小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)设计原则,针对HIF-1α基因设计并合成两条寡聚DNA片段,退火后克隆入pSilencer2.1-U6-neo质粒,应用脂质体将重组质粒转染BeWo细胞。缺氧培养后,应用Western blot法检测滋养细胞HIF-1α和TGF-3β蛋白表达水平,应用real time PCR法检测滋养细胞HIF-1α和TGF-3βmRNA表达水平。结果成功构建HIF-1α的shRNA真核表达载体,转染BeWo细胞。低氧条件下,细胞HIF-1α蛋白和mRNA表达下降;同时细胞TGF-3β蛋白和mRNA表达也降低。结论构建的HIF-1α基因shRNA表达质粒在低氧条件下明显抑制滋养细胞TGF-3β基因的表达。

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来源
《中国优生与遗传杂志》 |2009年第1期|18-20|共3页
作者
吴维光; 陈亚琼; 曹秀琴;
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作者单位

武警医学院附属医院妇产科;

天津300162;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类 R714.246;
关键词
缺氧诱导因子1α; 转化生长因子3; βRNA干扰; BeWo细胞;

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