慢病毒载体介导shRNA干扰IL-6Rα基因表达削弱IL-6对猪脂肪细胞分化的影响

杨永青; 刘凤兰; 秦素荣

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为研究白细胞介素-6(IL-6)对猪脂肪细胞分化的影响及其分子机制,构建猪IL-6Rα基因RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒载体;用IL-6Rα-RNAi重组慢病毒预处理原代培养的猪前体脂肪细胞或不处理,然后用100 ng/mL IL-6处理分化第6 d的脂肪细胞48 h.通过测定甘油释放量检测脂肪细胞的脂解率;油红O染色提取法测定脂肪细胞的脂质含量;采用RT-PCR和Western印迹检测脂肪细胞分化相关基因的mRNA和蛋白表达.结果显示,IL-6显著抑制猪脂肪细胞分化,并下调PPARγ2、Perilipin A和IRS-1的mRNA及蛋白表达,同时增强ERK1/2磷酸化;IL-6Rα-RNAi预处理前体脂肪细胞则显著逆转IL-6的上述作用.总之,IL-6通过多重机制抑制猪脂肪细胞分化;而且本研究构建的IL-6Rα-RNAi重组慢病毒载体可有效阻断IL-6信号,为进一步研究IL-6的功能奠定了基础.

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来源
《中国生物化学与分子生物学报》 |2013年第2期|151-160|共10页
作者
杨永青; 刘凤兰; 秦素荣;
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作者单位

山西师范大学生命科学学院;

山西临汾041000;

山西师范大学体育学院;

山西临汾041000;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类基因的表达;
关键词
慢病毒载体; RNA干扰; 白细胞介素-6; 白细胞介素-6受体α; 脂肪细胞分化;

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