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2009全国临床生化检验学术会议

2009全国临床生化检验学术会议

  • 召开年：2009
  • 召开地：上海
  • 出版时间： 2009-07

主办单位：中华医学会检验医学分会

会议文集：2009全国临床生化检验学术会议论文集

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  • 摘要：慢性肾脏病是值得关注的公共卫生问题。实验室技术人员和临床医生认识到估算肾小球滤过率(Egfr)在慢性肾脏病筛查中应该注意的若干问题和各种人血清肌酐测定系统的分析性能对其估算值的影响,对于MDRD方程在CKD诊断、治疗中的正确应用具有作用。本文介绍了各种常用肌酐测定系统间的变异、偏倚对Egfr估算值的影响及国际人血清肌酐测定标准化的进展。
  • 摘要：将CIO以上的脂肪酸称为游离脂酸(FFA),是指非酯化的脂肪酸或未脂化脂肪酸,血浆中的FFA是与清蛋白结合进行运输,属于一种极简单的脂蛋白,主要由贮存于脂肪组织中的TG被分解释放入血。血浆FFA是脂肪代谢的中间产物,主要来源于两条途径:在禁食或运动状态下,脂肪组织中储存的TG分解;或者餐后状态下,CM和LDL中的TG经脂蛋白脂酶脂解,在末梢组织以能源形式被利用。正常血清中含有油酸(C18.1)占54％,软脂酸(C16 1)占34％,硬脂酸(C18 1)占6％,是其主要的FFA。另外还有月桂酸(C22.0)、肉豆蔻酸(C14.0)和花生四烯酸(C20.1)等含量很少的脂肪酸。与其他脂质比较,FFA在血中浓度很低,其含量水平极易受脂代谢、糖代谢和内分泌功能等因素影响,血中FFA半寿期为1～2min,极短。FFA是人体内的一种重要能量来源,同时参与细胞增殖、炎性反应、激素调控等,也是一种具有多种生理功能的信号分子。根据饱和度的不同,FFA可分为饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸及多不饱和脂肪酸。多不饱和脂肪酸(PUFA)是指含有两个以上双键的脂肪酸,根据双键的位置可分为四族。其中较为重要的两类:一类是ω-3族脂肪酸；另一类是ω-6族脂肪酸。而根据碳链长度的不同,可将脂肪酸分为短链、中链及长链脂肪酸。在血浆中长链的脂肪酸与白蛋白结合而成可溶状态,短链脂肪酸有较大的水溶性,可以非解离的形式存在,或以阴离子的形式存在。rn 大量研究报道表明FFA不饱和程度及组分比例的改变与疾病的危险性相关。FFA对机体的的营能及生理调控功能主要通过特异性的受体介导完成。这些特异性受体属于G蛋白偶联受体超家族。FFA通过G蛋白偶联受体发挥生理功能，主要表现在以下几个方面:①调控葡萄糖稳衡;②影响细胞增殖;③影响白细胞功能。rn FFA影响众多疾病的发展过程，血浆总FFA浓度升高导致胰岛素抵抗、高血糖、代谢综合征、糖尿病肾病等。然而FFA中的PUFA却可以保护这些组织器官，维持机体平衡。严格控制血糖、血压的同时更加严格控制血浆FFA的浓度及调整其组成比。有可能预防和延缓疾病的发生，影响其发展和转归。
  • 摘要：代谢综合征(MS)的概念由来已久,其病因尚不十分明确。虽然世界卫生组织(WHO)、美国国家胆固醇教育纲要成人教育组第三次报告(NCEP-ATPⅢ)、国际糖尿病联盟(IDF)等组织先后分别提出相应的MS工作定义,但目前国际上尚无统一的适用于各种人群的诊断标准。近年来,各国投入大量人力和物力,从基础、临床和流行病学等多方面进行广泛而深入的研究,并取得了重要成果。本文简述其研究现状及相关实验诊断进展。
  • 摘要：目的：探索上海地区血清肌酐(Crea)临床检测结果的一致性,进行表面健康人群的参考范围调查,并通过改良的适用于中国人群的MDRD公式估算肾小球滤过率(eGFR),了解其分布情况,进一步评估eGFR的临床适用性。rn 方法：每次实验前将自动化分析系统校准品(c.f.a.s.)中含有的根据国际临床化学家协会(IFCC)推荐方法测得的Crea值传递到1份新鲜人混合血清,以此校准各参加医院检验科的Crea检测系统。14家医院检验科先后进行6次实验,并在检测结果基本一致后进行了6837例(男性3289例,女性2132例,儿童及青少年1416例)年龄段为0～99岁的表面健康人群Crea值测定及调查并依据文献发表的适用于上海人群的GFR估算公式[eGFR=175×(Scr)-1.154×(age)-0.203×0.742(女性)×0.827]估算表面健康人群的eGFR值。rn 结果：校准前各参加医院检验科之间的Crea检测值变异系数(CV)为3.1％～9.1％，校准后各医院之间检测值具有良好的一致性，CV降至5％以下。Crea参考范围调查后，得到结果为成年男性：63～102.8 μmol/L；成年女性：45～76 μmol/L；儿童及青少年：0～1岁：11～77μmol/L；2岁：15.5～33.3 umol/L；3～5岁：19～42 μmol/L；6～19岁;41.4～62 μmol/L。eGFR值可减小性别间的差异，但未能消除性别及年龄间差异。rn 结论：采用新鲜人混合血清，可以使不同医院(不同检测系统)之间的Crea值检测值差异明显减小；Crea参考范围应接性别年龄加以区分；eGFR适用于20岁以上人群，使用eGFR可减小性别差异，但无法完全消除。
  • 摘要：目的：研究酚磺乙胺对两种不同酶法检测血清肌酐的干扰。rn 方法：严格按照CLSl推荐的EP7-A干扰实验程序,设计配对差异试验和患者标本偏差分析考察对肌酐酶偶联肌氨酸氧化酶法和肌酐亚胺水解酶偶联谷氨酸脱氢酶法检测血清肌酐的影响。rn 结果：酚磺乙胺在0.003～0.3 g/L浓度范围内,肌酐酶偶联肌氨酸氧化酶法测定肌酐对照组标本和药物加入标本组肌酐检测结果差异有显著性(P<0.01),其干扰值在血清肌酐高、中、低浓度水平均大于-1.96S,病人标本偏差分析结果显示用药患者肌酐结果与非用药组差异有显著性(P<0.01)。而以肌酐亚胺水解酶偶联谷氨酸脱氢酶法检测,两组标本之间结果差异无显著性。rn 结论：酚磺乙胺对肌酐酶偶联肌氨酸氧化酶法法检测肌酐有负干扰,对肌酐亚胺水解酶偶联谷氨酸脱氢酶法检测无干扰。
  • 摘要：目的：建立新疆维吾尔族和汉族健康人群血清胱抑素C(Cycstain,cys-C)参考值范围。rn 方法：采用日立7600-20型全自动生化分析仪免疫比浊法检测923例维吾尔族和1256例汉族健康人血清cys-C水平。rn 结果：新疆地区血清cys-C水平参考值范围:<1岁的男性维吾尔族和汉族健康人血清cys-C水平95％可信区间分别为:0.85-0.95 mg/L,0.85-1.00 mg/L;女性分别为:0.82-0.93 mg/L,0.81-0.95 mg/L;1—60岁的男性维吾尔族、汉族健康人血清cys-C水平分别为:0.78-0.80 mg/L,0.79-0.82 mg/L;女性分别为:0.70-0.73 mg/L和0.71-0.74 mg/L;>60岁的男性维吾尔族、汉族健康人血清cys-C水平分别为:0.92-0.98 mg/L,0.92-0.96 mg/L；女性分别为:0.85-0.92 mg/L和0.91-0.96 mg/L。rn 结论：在<1岁和>60岁维吾尔族和汉族健康人群中,血清cys-C水平无民族和性别的差异(P>0.05),而在1-60岁健康人群中则具有性别的差异(P<0.05),无民族差异(P>0.05),且此年龄段的血清cys-C水平与其它年龄段有显著差异(P<0.05)。
  • 摘要：目的：探讨利用Au蛋白芯片检测尿蛋白指纹图谱在灵敏、快速预测肾功能损害中的应用价值。rn 方法：包括186例肾病患者和188例对照者(120名健康体检者及68例泌尿道结石患者)尿液标本。利用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(surface-enhanced laserdesorption-ionization time of flight massspectrometry,SELDl-TOF-MS)技术及Au蛋白芯片(proteinchip gold array)检测尿蛋白指纹图,分析肾病患者与对照组尿蛋白表达差异性并筛选标志蛋白,结合人工神经网络技术建立智能预测模型,评价其诊断肾病的应用价值。通过比对标准蛋白质谱数据,对部分差异蛋白进行鉴定。利用免疫散射比浊法检测尿微球蛋白与蛋白指纹图谱结果比较,评价SELDl-TOF-MS检测性能。rn 结果：肾病患者与对照者尿中共检测到214个蛋白质峰,差异具有统计学意义的蛋白质峰有15个(P<0.001),筛选其中质荷比(m/z)11735、23770、51720、58720、67650、80045、91240蛋白质建立的人工神经网络模型预测肾功能损害的灵敏度为98.8％(85/86),特异度为96.6％(85/88)。通过与标准蛋白质谱数据比对分析,初步判定11735、23770、67650、80045 m/z蛋白分别为β2-微球蛋白、α1-微球蛋白、白蛋白、转铁蛋白。SELDl-TOF-MS检测微球蛋白较免疫散射比浊法更灵敏。rn 结论：基于Au蛋白芯片技术的尿蛋白指纹图谱检测,可快速、灵敏、高通置的显示尿蛋白表达情况,对诊断肾损伤、判断蛋白尿类型及治疗评价具有重要的应用价值。
  • 摘要：目的：β2-糖蛋白Ⅰ是抗心磷脂自身抗体与心磷脂结合所必需的辅因子,是血循环中的天然抗凝剂。β2-糖蛋白Ⅰ具有与各种阴离子物质结合的特性。脂蛋白(a)是血栓和心脑血管疾病的独立危险因素。体外实验发现,β2-糖蛋白Ⅰ与脂蛋白(a)具有一定的亲和力,提示β2-糖蛋白Ⅰ与脂蛋白(a)结合形成复合物的可能性。本文建立检测人血清β2-糖蛋白Ⅰ/脂蛋白(a)复合物的双抗体夹心酶联免疫吸附法,探讨该复台物存在于人血循环中的可能性,并通过对IgA肾病患者的检测,评价该复合物的临床诊断价值。rn 方法：以抗人β2-糖蛋白Ⅰ抗体为包被抗体、酶标记抗载脂蛋白(a)为检测抗体建立双抗体夹心酶联免疫吸附法,对50例IgA肾病患者和50例健康对照者检测分析。rn 结果：建立的β2-糖蛋白Ⅰ/脂蛋白(a)检测法批内、批间变异系数为6.6％和13.02％,在0.33～1.83 U/ml范围内呈线性。IgA肾病组β2-糖蛋白Ⅰ/脂蛋白(a)水平显著高于对照组(1.45±0.57 U/ml vs 0.42±0.29U/ml,P<0.0001)，检测敏感性80％,特异性为96％。rn 结论：β2-糖蛋白Ⅰ与脂蛋白(a)能以复合物的形式存在于人血循环中，该复合物在IgA肾病患者血清中的水平明显增高，提示其潜在的临床诊断价值。
  • 摘要：目的：研究溶血、黄疸和脂浊样本对常用临床生化检测项目的干扰程度及规律。rn 方法：将阳性干扰物加入正常的混合血清中,与干扰对照样品比较有无偏倚。经全自动生化分析仪同时测定32个临床生化项目和血清指数,评价干扰物浓度与干扰程度间的关系,并做统计学处理。rn 结果：①溶血0.5～1g/L时,对LDH、ALT、AST测定有干扰；溶血1～2g/L时,对TBIL、UA、P、Lpa测定有干扰:溶血2～4g/L时,对GGT、DBIL、K、TP、GLU(葡萄糖氧化酶法)、CRE2(苦味酸法)、FMN、CK测定有干扰；溶血>12g/L时,对CRE(酶法)、CK-MB测定有干扰。②游离胆红素(Fbil)>35.9umol/L时,对TBA、FMN测定有干扰；Fbil>78.6umol/L时,对CRE测定有干扰:Fbil在143～215umol/L时,对TG、TCHO测定有干扰；Fbil>287.2umol/L时,对GLU测定有干扰；Fbil在359～430.8umol/L时,对ALT、GGT、CK-MB、GLU2(己糖激酶法)测定有干扰。rn 结论：溶血对酶法测定的大部分检测项目干扰明显，以LDH尤为敏感；黄疸对CRE、GLU、TCH0、CK-MB测定均有干扰；TBIL、DBIL、P、CRE2、TBA、PA及脂蛋白的测定均受脂浊干扰。在解释结果时,应当考虑干扰因素，提高结果的可靠性。
  • 摘要：目的：采用高分辨熔解曲线(high-resolution melting,HRM)方法检测痛风患者SLC22A12基因intron5(+4668C/T)单核苷酸多态性,并分析该多态性与痛风患者临床特征的相关性。rn 方法：选取101名原发性痛风患者和186名健康志愿者,分别记录血压、体质量指数，检测血尿酸、血糖、血脂、肌酐水平,提取外周血DNA,扩增SLC22A12基因5号内含子片段,并采用高分辨熔解曲线技术分析其多态性,并用测序法证实。rn 结果：成功地在SLC22A12基因5号内含子内发现一新的SNP位点,命名为intron5(+4668C/T)。HRM技术检测能准确区分CC、CT和TT基因型,其结果与测序法一致。三种基因型在男性、女性个体中的分布分别为:28.1％、33.7％、38.2％；20.0％、47.1％、32.9％。无论在男性组内还是女性组内,体质量、血压、肌酐、总胆固醇和甘油三脂中各基因型分布均无统计学意义,但各组内CC基因型的尿酸水平明显高于CT+TT基因型的尿酸水平。低尿酸组内CC基因型和CT+TT基因型频率与高尿酸组相比,差别有显著意义(21.2％,78.8％,35.0％,65.0％；P<0.05)。rn 结论：采用HRM成功地在SLC22A12基因5号内含子内发现一新的SNP位点，并建立了对该SNP位点简单、快速和精确的分析方法；推测intron5(+4668C/T)中T等位基因可能为中国人高尿酸血症的遗传保护因子。
  • 摘要：目的：通过检测原发性肝细胞癌(HCC)患者糖化血清蛋白,分析其在HCC患者中的分布比例；并将其与其它代谢指标如空腹血糖、游离脂肪酸等进行分析比较,评价这些指标对于HCC患者合并代谢紊乱的应用价值。rn 方法：收集乙型肝炎病毒感染相关的HCC患者血清(n=179),应用糖化白蛋白测定试剂盒,生化自动分析仪检测。其余参数采用常规检测方法进行。rn 结果：179例HCC患者中有20％(35例)GA值大于参考值,其均值与标准差为:15.58±3.80。GA与其它临床多项代谢指标如游离脂肪酸、空腹血糖及血清白蛋白、血清前白蛋白等具有相关性(P<0.05)。将HCC患者接肿瘤TNM分级分为四期,其单因素方差分析结果具有统计学意义(P<0.01),随着肿瘤的严重程度,其值逐渐升高。GA在HBeAg阳性组高于阴性组(P<0.05)。rn 结论：在HCC患者中随着肿瘤等级的加重，如同空腹血糖的变化规律，GA值随之升高，一方面提示晚期肝癌患者合并糖代谢紊乱，另一方提示GA的检测结果不受肝功能损伤的千扰；GA与空腹血糖浓度密切相关，因此可以较空腹血糖更方便地反映肝病患者测定前2～3周内的血糖水平。
  • 摘要：目的：研究tribbles同源物1(果蝇)(TRIB1)基因内含子区和3’UTR区三个TagSNPs(内含子区:rs235109,rs235110,3’UTR区:rs235108)多态性与冠心病的关系及其在湖北省汉族人群中的分布特征。并比较其基因型和等位基因在正常人和冠心病人群中的分布情况,分析其在湖北省汉族人群中的分布特征,检验基因型频率与Hardy-Weinberg平衡定律符合程度,计算各个位点的多态信息量(polymorphic informationcontent,PIC)及杂合度(heterozygosity,H)。rn 方法：采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态(PCR-RFLP)方法对湖北地区236名健康汉族人和139名冠心病患者的TRIB1基因单核苷酸多态性(single nucleotidepolymorphism,SNP)进行分析。并用PCR产物纯化后测序验证酶切结果,所有的数据均采用统计软件SPSS 14.0分析。rn 结果：TRIB1基因TagSNP的分布特征符合Hardy-Weinberg平衡定律(rs2235110：x2=0.481，P=0.488；rs2235108：x2=0.570，P=0.450).上述多态性位点在冠心病和正常人群中的分布无统计学差异。但具有中等多态信息量(rs2235110位点PIC=0.3687，H=O.4875)，几乎达到其PIC的理论最大值。rn 结论：rs235108，rs235109，rs235110各位点的基因型和等位基因频率可代表湖北省汉族人群的分布特征，几个SNP构成单倍型联用可作为一个理想的遗传标记。但没有发现它们与冠心病人群的相关性。
  • 摘要：目的：观察氧化应激状态下,不同代龄人胚肺二倍体成纤维细胞(2BS)DNA损伤水平以及损伤后修复能力的变化。rn 方法：以体外培养不同代龄2BS细胞为对象,利用彗星试验及CASP彗星分析软件,观察不同代龄2BS细胞分别经不同浓度(50uM、100uM、200uM)的过氧化氢(H2O2)处理后尾部DNA％(TDNA％)与Olive尾距(OTM)的变化,SPSS11.5软件进行统计掌分析,绘制并拟合OTM-代龄与OTM-剂量曲线图。rn 结果：2BS细胞经H202损伤后,TDNA％与OTM均随H202浓度升高而增大,年轻细胞(26PD)组OTM值与损伤剂量呈良好的线性关系(回归方程为Y=-7.49+0.144X,r=0.997,P=0.047)；而中年、衰老细胞组其线性关系均不显著(P>0.05):随代龄增加,DNA抗氧化应激能力逐渐降低,低浓度(50uM)H2O2处理组OTM值与细胞代龄之间呈显著线性关系(回归方程为Y=-36.143+1.281X,r=0.974,P=0.026),而中(100uM)、高(200uM)浓度组其线性关系均不显著(P>0.05)；衰老细胞(>55代)损伤修复能力显著低于年轻细胞(p<0.05)。rn 结论：氧化应激状态下,DNA损伤水平随增龄而增加,DNA修复能力随增龄而下降,并且线性关系明显。
  • 摘要：目的：通过检测患者的肾小球滤过率(glomerular filtrationrate,GFR),了解住院患者的肾功能及肾脏损害程度。应用肾脏疾病饮食改良简化公式(modification of diet inrenal disease,MDRD),为临床选择药品及用药量提供更可靠的依据。rn 方法：通过统计7750例成年患者的基本信息,按照性别、年龄、疾病的不同类型及血肌酐数值进行分组。利用MDRD估算出患者的GFR。肾损害程度分期采用美国肾病学会(NKF)2002年的慢性肾病(chronickidney disease,CKD)分期。rn 结果：7750例样本中，38.5％的患者存在肾功能不全的情况(GFR<90ml/min)，31.7％的患者存在隐匿性肾功能不全(血肌酐<106umol，GFR<90ml/min)。rn 结论：由于住院病人多数存在肾功能受损情况，因此应用MDRD更准确地估算GFR值有利于临床医生在治疗中采用不同的治疗方案。
  • 摘要：目的：研究糖尿病病人不同时段尿微量白蛋白(Urinarymicroalbumin,UMA)的排泌情况及尿微量白蛋白在诊断早期糖尿病肾脏损伤中的应用。 rn 方法：收集中山医院门诊及住院糖尿病患者三天内不同时间段的尿液,分析尿微量白蛋白天内、天间的排泌变化情况；以24小时尿白蛋白为标准判断肾脏早期损伤情况,比较不同时段尿与24小时尿白蛋白的相关性及诊断特异性及敏感性；评估不同时间段随机尿诊断特异性及敏感性,推导随机尿最佳诊断水平。rn 结果：80例糖尿病患者尿微量白蛋白天内变异均值较大(CV:0.663％ ±0.072％),以肌酐和尿量分别校正后,天内变异减小(CV％:0.508±0.056及0.581±0.059)。以30μg/mg肌酐作为随机尿微量白蛋白/肌酐比值(UMA/Ucr)的阈值(cut-off),不同时间段尿(晨尿、餐后尿、随机尿及夜间尿)在肾脏早期损伤诊断中的阳性预期值分别为76.67％、75.00％、75.73％及81.25％,与24小时尿微量白蛋白定量的相关系数(r2)分别为0.900、0.584、0.791及0.976。以30 μg/mg肌酐作为UM/Ucr的cut-off值,假阴性率及假阳性率分别为19.74％及7.8％,其对应的敏感性、特异性、阳性似然比(+LR)及阴性似然比(-LR)分别为0.874、0.971、30.14及0.130。以12.95 μg/mg肌酐作为UMA/Ucr的cut-off值可得到最小-LR(0.0114),以87.35 μg/mg肌酐作为UMA,Ucr的cut-off值可得到最大+LR(481)。rn 结论：肌酐较尿量能更好的降低尿微量白蛋白天内变异，但仍无法完全消除变异。夜尿与24小时微量白蛋白定量相关性最好，可替代24小时尿微量白蛋白定量。随机尿作为最方便留取的尿液标本亦可以较好的替代24小时尿微量白蛋白定量，以12.95 μg/mg及87.35 μg/mg作为随机尿UMA/Ucr的排除值及确诊值可以基本排除和确诊微量白蛋白尿，若随机尿UMA/Ucr结果在两个阈值之间，则建议病人根据2004年美国糖尿病协会(ADA)筛查微量白蛋白尿的流程进行筛查或进行长期的随访。
  • 摘要：目的：应用MDRD四变量公式估算肾小球滤过率(eGFR),以eGFR<60ml/min或出现微量白蛋白尿为肾功能损伤的判断界限,观察相关实验室指标的异常表现。rn 方法：选择内科正常饮食的住院病人(非移植病人)425例,其中男263人,女162人。酶法测定血肌酐,先溯源至ROCHE苦昧酸法得到校正后的肌酐浓度,使用改良4v-MDRD公式.计算eGFR；增强免疫比浊法测定hsCRP、CysC；特定蛋白分析仪(BN ProSpec)测定MAU,SysmexUF 100测定尿常规；以ROC曲线确定CysC的临床cut-off值;根据尿微量白蛋白/尿肌酐比值,比较正常尿液组、微量白蛋白尿组和显性白蛋白尿组实验室各指标的检测差异。rn 结果：(1)现有的酶法检测血肌酐与罗氏苦味酸法测定相关性好，r=0.9998。(2)正常对照组、eGFR轻度、中度及重度损伤组的CysC浓度分别为0.82，1.00，1.17，2.94 mg/L；血肌酐相对应的浓度分别为51.8，70.5，94.0，547 umol/L(p<0.01)。相关分析显示：eGFR与肌酐、CysC、年龄、胆固醇浓度、尿微量白蛋白、三酰甘油、低密度脂蛋白浓度相关(p<0.05)。(3)以eGFR<60 mL·(min·1.73m)-1为判断肾功能损伤的界限，Scr，CysC，MAU，MAU/UCRE比值，hsCRP的ROC曲线下面积分别为0.939，0.781，0.666，0.662，0.600。由ROC曲线所得Scr，CysC的cut-off值分别为83.2 umol/L(敏感性80.5％，特异性92.3％)和0.935 mg/L(敏感性80.5％，特异性61.9％)。(4)出现微量白蛋白/显性白蛋白尿组中CysC升高、eGFR减低、Scr升高的异常率分别为75％、52.3％、21.7％；eGFR中度损伤时,CysC、MAUIUCRE与SCF的异常检出率为82％、43.4％和28.6％。(5)糖调节受损伴高血压病且年龄超过55岁的174 例患者中，eGFR下降、微量白蛋白尿、CysC升高、hsCRP升高的检出率分别为40.8，47.7％，89.9％，60.9％，而Scr升高只有24.6％。rn 结论：(1)可以在正常饮食的内科病人中引入校正肌酐浓度计算的eGFR，以eGFR、CysC、MAU/UCRE比值及尿常规检测来初步判断肾功能的早期改变。(2)CysC有助于检出MAU，uCRE阴性但GFR降低的患者。(3)可以凭借CysC、MAU/UCRE比值、eGFR、hsCRP等在血糖调节异常伴高血压病且年龄超过55岁的人群中筛查早期CKD。
  • 摘要：目的：观察胰岛素受体底物-1表达受阻对小鼠3T3-L1前脂肪细胞分化和PPARγ表达的影响。rn 方法：针对小鼠IRS-1基因开放阅读框上的2个区域合成shRNA(M和MH),以pGenesil-1 vector为载体构建带绿色荧光蛋白(Green Fluorescence Protein,GFP)靶标的shRNA质粒。以脂质体Lipofectamin TM 2000介导转染3T3-L1前脂肪细胞,并设阴性对照(HK)载体转染组。细胞转染后,G418筛选稳定表达的阳性克隆并通过Western blot鉴定。应用3-异丁基-1-甲基黄噤呤(3-isobutyl-1-methylxanthine,lBMx)0.5mM,地塞米松(Dexamethasone,DEX)10-6M和胰岛素(Insulin,Ins)5 μg/mL分别诱导小鼠3T3-L1前脂肪细胞空白对照组、阴性对照(HK)载体转染组、M和MH转染组分化,在诱导分化的不同时间点收集细胞。用Western Blot检测PPARγ的表达。脂肪细胞内脂滴用油红O染色观察。rn 结果：与空白对照组、阴性对照组和转染M组IRS-1 shRNA质粒的3T3-L1前脂肪细胞相比,转染MH组IRS-1shRNA质粒的3T3-L1前脂肪细胞IRS-1蛋白表达水平降低70％以上;而MH转染组细胞PPARY蛋白的表达与前三组3T3-L1前脂肪细胞比较无改变。前三组3T3-L1前脂肪细胞诱导分化为成熟脂肪细胞成功，PPARy蛋白的表达存脂肪细胞分化成熟过程中逐渐增高，油红O染色显示，随着脂肪细胞的分化成熟，桔红色脂滴逐渐增多；而转染MH组IRS-1 shRNA质粒的3T3-L1前脂肪细胞经诱导，油红O染色桔红色脂滴显著减少，直到分化的第8天，才见少许桔红色脂滴，且PPARγ蛋白的表达无变化。rn 结论：IRS-1基因沉默后可抑制3T3-L1前脂肪细胞的分化，并在分化过程中抑制PPARγ的表达,说明IRS-1通过调节PPARγ的表达或与PPARγ共同作用在3T3-L1前脂肪细胞的分化中发挥决定性作用。
  • 摘要：目的：探讨糖化白蛋白(GA)、超敏C反应蛋白(hsCRP)以及脂蛋白(a)(LP(a))等生化指标在2型糖尿病合并冠心病预测中的作用。rn 方法：选择2型糖尿病合并冠心病患者共69例(A组),单纯2型糖尿病患者共67例(B组)以及健康对照组共77例(C组)。分别检测其血清或血浆GA、hsCRP、糖化血红蛋白、LP(a)等生化指标。经经受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析获得区分A组与B组的最适界值点(cutoff值)。rn 结果：A组与B组、C组间GA、hsCRP、LP(a)值的差异均具有统计学意义。GA ROC曲线下面积0.607,在最适cutoff值为18.89％时,敏感性为73.9％,特异性为552％。hsCRP ROC曲线下面积为0.746,在最适cutoff值为95.09 mg/L时敏感性和特异性分别为50.7％和80.1％。脂蛋白(a)ROC曲线下面积0.630,在最适cutoff值为40mg/L时,敏感性为87.0％,特异性为40.3％。rn 结论：2型糖尿病合并冠心病患者的GA、hsCRP、LP(a)水平明显升高，GA是2型糖尿病是否合并冠心病预测的一个有用指标。
  • 摘要：目的：探讨心肌损伤标志物一H-FABP和心肌缺血标志物—缺血修饰白蛋白(IMA)联合检测能否提高ACS的诊断效率。rn 方法：选择北京大学第三医院2005年11月至2006年10月就诊患者共108例,所有患者在胸痛发作12小时内采血。孕妇、有急性肠系膜缺血症状或体征者、急性肾功能衰竭者、外周血管疾病者或脑缺血者被排除。满足以上纳入标准的患者共172例,其中108例被最终纳入本研究；7例由于标本采集时间不准确而被排除,18例由于病例资料不完整被排除,39例由于cTnT阳性而被排除。因此,研究人群由108人组成,56名男性和52名女性。平均年龄59岁(37-79岁)。患者被分为两组:ACS组和非缺血性胸痛组(NICP)。血液标本离心分离血清后放置于-80℃冰箱种备用。冰冻标本在分析前复溶并且充分混匀。血清IMA检测采用的是白蛋白钴结合方法(ACB),在全自动生化分析仪Hitachi 7170上完成。H-FABP通过免疫层析方法检测,试剂由深圳康生宝生物有限公司馈赠。rn 结果：ACS组ACB结台能力[64(61-67)U/ml]与NICP组[75(71-78)U/ml]比较明显下降，有统计学差异(P<0.05)。通过RoC曲线分析，ACB水平的台适的诊断界值为70.5U/ml。ACB水平小于71.0U/ml时敏感性和特异性分别为89.0％和80.8％，曲线下面积为0.876[95％可信区间0.783-0.970]。阳性预测值和阴性预测值分别为93.6％和70.0％。H-FABP的诊断敏感性和特异性分别为82.9％[74.8-91.0％]和80.8％[65.7-95.9％]。诊断的准确性为82.4％[75.2-89.6％]。IMA与H-FABP联合检测的敏感性及特异性分别为96.3％[96.2-100％]和80.8％[65.7-95.9％]，诊断的准确性为92.6％[87.7-97.5％]。与其他指标单独检测相比,二者联台检测的敏感性及诊断的准确性有显著性差异(P<0.05),阳性预测值与阴性预测值分别为94.0％和87.5％。IMA和H-FABP联合检测的敏感性[96.3％(92.2-100％)]和特异性[92.6％(87.7-97.5％)]明显高于单独检测(P<0.05)。rn 结论：胸痛发生后联合检测IMA和H-FABP可能提高肌钙蛋白T正常的急性冠脉综合征患者的诊断效率。

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