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三焦针法对阿尔茨海默病模型小鼠学习和记忆功能及相关基因的影响

         

摘要

目的探讨三焦针法治疗阿尔茨海默病(AD)的可能作用机制。方法以SAMP8小鼠为AD动物模型。60只SAMP8小鼠随机分为对照组、针刺组和非穴组,每组20只。针刺组小鼠给予三焦针法干预,穴位选取“膻中”“中脘”“气海”及双侧“血海”“足三里”。非穴组取双侧肋下固定非经非穴点,左右各1个。对照组进行与以上两组相同时间、程度的捉抓刺激。每天1次。干预1个月后连续5天每天采用Morris水迷宫隐蔽平台测试检测各组小鼠学习记忆能力,再提取各组小鼠海马组织的总RNA用于基因芯片检测。基因芯片检测数据导入LINCS项目下CREEDS网络在线分析工具进行模拟效应、反向效应模式的基因差异表达模式分析。提取各组小鼠海马组织,采用等重同位素多标签相对定量蛋白质组分分析(i TRAQ)法,以对照组海马蛋白质谱为背景,寻找针刺组与非穴组差异表达蛋白,并在DAVID在线生物信息学注释工具中检索相应蛋白生物学功能。结果针刺组小鼠第1-5天逃避潜伏期均较对照组和非穴组显著缩短(P <0. 05);反向效应模式分析结果显示,针刺组反向效应相关的疾病是亨廷顿舞蹈病和胎儿酒精发育失调疾病;单基因反向效应模式分析结果显示,与针刺组基因表达模式相反度最高排名前2的基因分别是Pde10a和Pink1;单基因模拟效应模式分析显示,针刺效应在基因表达水平与Wfs1和Psap基因过表达的效应相似;小分子药物模拟效应模式分析显示,针刺组在基因表达水平与小分子药物D型丝氨酸的表达特征最相似。对i TRAQ定量分析蛋白质组的注释,发现针刺上调了神经元突起以及线粒体相关蛋白的表达。结论三焦针法可明显改善SAMP8小鼠学习记忆能力,可能是通过触发一种包含调节神经元突触可塑性、激发神经元内质网细胞应激反应和神经保护、逆转神经退行性病变进程等多个功能模块的复杂反应模式实现。

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