GPI锚定蛋白介导嵌合新城疫病毒样颗粒的组装

李金斗; 钱晶; 丁佳欣; 徐小洪; 秦岭松; 黄蕾; 武淑婷; 丁伟; 尹仁福; 丁壮

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GPI锚定蛋白介导嵌合新城疫病毒样颗粒的组装

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当前嵌合病毒样颗粒(chimeric VLPs,cVLPs)策略主要基于融合序列的基因转染水平,但该方法存在多基因表达操控困难、锚定蛋白无法定量等问题。糖基磷脂酰肌醇(glycosylphosphatidylinositol,GPI)是一种蛋白与细胞膜结合的方式,改造的GPI锚定蛋白可以被定量嵌合至真核细胞膜表面。因此,本研究以可溶性蛋白、Ⅰ型跨膜蛋白、Ⅱ型跨膜蛋白为嵌合对象,以GPI锚定方式将外源蛋白嵌合至新城疫病毒样颗粒(NDV VLPs)表面。流式细胞术检测可见GPI锚定蛋白可锚定至各真核细胞表面,并且与孵育时间呈正相关性;各组装GPI-cVLPs在电镜观察下具有完整的病毒粒子结构,与野生型NDV相似;经Western blot检测分析各GPI-cVLPs与NDV阳性血清和His单抗发生反应。综上,该GPI锚定策略能有效将外源蛋白嵌合至NDV VLPs,可为NDV VLP载体平台的应用奠定基础。

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来源
《中国兽医学报》 |2017年第6期|969-975|共7页
作者
李金斗; 钱晶; 丁佳欣; 徐小洪; 秦岭松; 黄蕾; 武淑婷; 丁伟; 尹仁福; 丁壮;
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作者单位

吉林大学动物医学学院人兽共患病研究教育部重点实验室;

吉林长春130062;

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正文语种 chi
中图分类家畜病毒学;
关键词
GPI锚定蛋白; 嵌合; 新城疫病毒样颗粒; 组装;

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