人B7H4启动子荧光素酶报告基因载体的构建及活性分析

林雨虹; 林怡婷; 周琳琳; 张秋玉

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人B7H4启动子荧光素酶报告基因载体的构建及活性分析

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为构建人B7H4基因启动子荧光素酶报告基因载体,以人外周血单个核细胞基因组DNA为模板,PCR扩增3条不同长度人B7H4启动子序列,并插入PGL3-Basic荧光素酶报告基因载体中;待测序验证后,将3个重组质粒及pRL-TK内参质粒分别共转染HEK-293T细胞,采用双荧光素酶报告基因系统检测其启动子活性。测序结果显示构建的3个人B7H4基因启动子重组载体序列正确;重组载体转染HEK-293T细胞,经双荧光素酶报告基因检测确定重组载体有启动子活性,其中PGL3-hB7H4-0.5kb重组载体的转录活性较高。本研究成功构建了3条含不同长度的B7H4启动子序列的荧光素酶报告基因系统,为后续分析人B7H4启动子的转录调控元件及肿瘤微环境中调控B7H4表达的作用因素等研究奠定了实验基础。

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来源
《现代免疫学》 |2018年第1期|19-24|共6页
作者
林雨虹; 林怡婷; 周琳琳; 张秋玉;
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作者单位

福建医科大学基础医学院免疫学系;

福州350108;

福建医科大学免疫治疗研究所;

福州350108;

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正文语种 chi
中图分类免疫遗传学;
关键词
B7H4; 启动子; 荧光素酶报告基因; 载体构建;

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