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人疱疹病毒6型感染神经胶质瘤细胞中miR-301a表达的变化及生物学意义

         

摘要

人疱疹病毒6A型(Human Herpesvirus 6A,HHV6A)感染与神经胶质瘤的发病有关,但具体机制尚不清楚。HHV6A感染能够增加miR-301a的表达,而miR-301a表达在胶质瘤发病中起促进作用。为了观察HHV6A感染神经胶质瘤细胞中miR-301a表达的变化及生物学意义,本研究培养了神经胶质瘤细胞株U87、U251、U373,HHV6A感染后检测了miR-301a及RUNX3(Runt-Related Transcription Factor 3,RUNX3)的表达;U87细胞在感染HHV6A的同时分别转染阴性对照(Negative Control,NC)miR、miR301a抑制物、NC siRNA、RUNX3 siRNA,检测细胞增殖、迁移、侵袭;采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-301a靶向RUNX3。结果显示,HHV6感染的U87、U251、U373细胞中miR-301a表达增加、RUNX3表达降低且HHV6感染的U87中miR-301a上调、RUNX3下调幅度最大。在U87细胞中,与对照组比较,HHV6组增殖、迁移、侵袭增强,RUNX3表达降低;与miR-NC+HHV6组比较,miR-301a敲低+HHV6组增殖、迁移、侵袭减弱,RUNX3表达增加;与HHV6+miR-301a敲低+si-NC组比较,HHV6+miR-301a敲低+si-RUNX3组增殖、迁移、侵袭增强,RUNX3表达降低;经双荧光素酶报告基因验证,miR-301a靶向RUNX3基因mRNA 3’UTR。结果表明,HHV6A感染神经胶质瘤细胞中miR-301a表达增加,进而通过靶向抑制RUNX3促进细胞增殖、迁移、侵袭。本研究初步探究了HHV6A感染促进神经胶质瘤细胞增殖、迁移、侵袭的作用及分子机制,进而为深入认识神经胶质瘤恶性生物学行为的调控机制及发病机制提供了实验依据,也为今后发现神经胶质瘤新的防治靶点提供思路。

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