高致病性猪蓝耳病病毒GST-N融合蛋白的原核表达及纯化

李晓辉; 何建斌; 刘金玲; 罗芳

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高致病性猪蓝耳病病毒GST-N融合蛋白的原核表达及纯化

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为了构建高致病性猪蓝耳病病毒(HPPRRSV)GST-N融合蛋白,试验采用RT-PCR技术扩增ORF7基因片段,对其胶回收产物进行测序分析,再将目的片段连接到质粒PGEX-6P-1上,得到重组质粒PGEX-6P-1-N,并转化到E.coliBL21(DE3)感受态细胞中,筛选阳性菌落,并用IPTG进行诱导表达,应用SDS-PAGE和Western-blot对表达产物进行检测与鉴定。结果表明:该序列与GenBank公布的HN2007的同源性为97%;重组质粒在大肠杆菌中获得了表达,表达产物为42ku的GST-N融合蛋白。

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来源
《黑龙江畜牧兽医》 |2010年第4期|30-32|共3页
作者
李晓辉; 何建斌; 刘金玲; 罗芳;
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作者单位

沈阳农业大学畜牧兽医学院;

辽宁沈阳110161;

公安部昆明警犬基地;

云南昆明650204;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类 S852.659.6;
关键词
ORF7基因; 原核表达; 纯化; GST—N融合蛋白;

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