区分NDV强弱毒株的抗鸡新城疫病毒La Sota株NP蛋白单克隆抗体1E3的制备与鉴定

王赛楠; 李利杰; 赵振超; 孙文杰; 张世华; 何春辉; 李新生

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因缺少快速区分鸡新城疫病毒(NDV)毒力强弱的方法而导致临床确诊困难,本研究使用纯化浓缩的NDV La Sota株作为免疫原,强化免疫6周龄BALB/c小鼠,经细胞融合及亚克隆,获得3株稳定分泌抗NDV单克隆抗体的杂交瘤细胞株:1E3、7A8、8F11。分泌的单克隆抗体均与La Sota株具有良好的特异性反应,而与禽流感病毒(AIV)、鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)、禽腺病毒(FAdV-4)均呈阴性反应。抗体分型测试显示,1E3和8F11为IgG1亚型,7A8为IgM亚型,其轻链皆为κ链。7A8对La Sota株具有一定的中和活性。用单抗1E3建立的间接ELISA方法可明确区分基因Ⅱ型的NDV弱毒疫苗La Sota株与基因Ⅸ型NDV强毒F_(48)E_(9)株和基因Ⅶ型NDV强毒HN_(09-68)株。经SDS-PAGE、Western blot和二级质谱测定,1E3是对应NDV La Sota株NP蛋白的单克隆抗体。可见,抗La Sota株NP蛋白单抗1E3的制备和以其为基础建立的间接ELISA方法,可快速区分NDV强毒株和弱毒疫苗株,这将为鸡新城疫快速诊断和防疫决策提供重要工具。

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来源
《中国兽医学报》 |2021年第8期|1495-1500|共6页
作者
王赛楠; 李利杰; 赵振超; 孙文杰; 张世华; 何春辉; 李新生;
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作者单位

河南农业大学动物医学院;

河南郑州450002;

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正文语种 chi
中图分类家畜病毒学;
关键词
新城疫病毒; 单克隆抗体; 强弱毒株; NP蛋白;

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