产肠毒素大肠埃希菌CfaB亚单位的免疫原性分析

贺志良; 姜柯安; 宋方洲; 马永平

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产肠毒素大肠埃希菌CfaB亚单位的免疫原性分析

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目的表达并纯化产肠毒素大肠埃希菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)CFA/I定居因子的CfaB亚单位,分析其免疫原性。方法将不含信号肽序列的cfaB基因克隆到pQE-30上,构建重组质粒pQE-30-cfaB并转化E.coli M15,表达融合蛋白6×His-CfaB,将表达的蛋白纯化和复性后免疫BALB/c小鼠,制备抗CfaB的抗血清,用ELISA法检测抗血清效价。结果 6×His-CfaB融合蛋白高效表达,相对分子质量为15.5 kD,纯化复性后免疫小鼠所得抗血清效价为1∶125000。结论成功构建了高效表达6×His-CfaB融合蛋白的重组质粒,表达的融合蛋白免疫小鼠后获得了高效价的抗血清,为进一步研制以双歧杆菌为表达系统的新型ETEC亚单位口服疫苗奠定了基础。

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来源
《中国微生态学杂志》 |2012年第3期|215-218|共4页
作者
贺志良; 姜柯安; 宋方洲; 马永平;
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作者单位

重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室;

重庆400016;

重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心;

重庆400016;

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正文语种 chi
中图分类基因的表达;免疫学技术、设备及实验方法;
关键词
CfaB亚单位; 原核表达; 抗血清; 免疫原性;

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