目的将一种新颖的核酸扩增技术—依赖核酸扩增技术(nucleic acid sequence-based amplification NASBA)应用于轮状病毒的快速检测与辅助诊断。方法根据美国国家生物技术信息中心(National Center for Biotechnology Information,NCBI)轮状病毒VP7基因保守序列设计引物,建立NASBA检测方法,进行特异性、灵敏度和重复性试验,以所建立方法和RT-PCR方法同时对108例临床病毒性腹泻患者粪便样本进行检测。结果所建立的NASBA方法对轮状病毒具有较好的稳定性和高度特异性,与诺如病毒等8种腹泻相关病毒均无交叉反应,灵敏度达5μg/L。108份粪便样本中,用RT-PCR方法检出轮状病毒阳性11份,用NASBA方法检出阳性样本13份。结论本研究应用的轮状病毒NASBA检测方法特异、灵敏、快速简便,适用于轮状病毒的日常监测和暴发疫情的应急诊断。
展开▼
