miR-7基因敲减对LPS诱导巨噬细胞炎症反应的影响

陈慧子; 郭萌萌; 赵娟娟; 岳东旭; 丁涛; 陈超; 徐林

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miR-7基因敲减对LPS诱导巨噬细胞炎症反应的影响

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观察miR-7基因敲减(knockdown, KD)对LPS诱导的巨噬细胞炎症反应的影响,并初步探讨其机制。分别用0、50、100、200 ng/mL LPS刺激野生型(wild type, WT)小鼠骨髓来源巨噬细胞12 h,经实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR, Real-time PCR)检测发现,随着LPS刺激浓度的增加,巨噬细胞中miR-7的表达水平逐渐升高,且在100 ng/mL LPS浓度刺激下miR-7表达最显著(P<0.01)。用100 ng/mL LPS处理miR-7 KD小鼠和WT小鼠骨髓来源巨噬细胞12 h,镜检观察到巨噬细胞形态均由圆形变为长梭形,并伸出长长的伪足。应用流式细胞术检测巨噬细胞表面CD80和CD86分子的表达情况,结果显示,LPS作用后,miR-7 KD小鼠骨髓来源巨噬细胞表面CD80和CD86的比例较WT小鼠显著上调(P<0.05)。Real-time PCR和ELISA结果显示,miR-7 KD小鼠巨噬细胞在LPS刺激后,炎性因子IL-1β、IL-6和TNF-ɑ的表达显著增加(P<0.05)。Western blotting检测结果显示,LPS刺激后,与对照组相比,miR-7 KD小鼠巨噬细胞中NF-κB p65和p-NF-κB p65的蛋白水平显著升高(P<0.01)。以上数据显示,miR-7基因KD可显著增强LPS诱导的巨噬细胞炎症反应,可能与NF-κB信号通路的传递增强有关,提示miR-7在巨噬细胞炎症过程中发挥重要的调控作用。

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来源
《现代免疫学》 |2019年第3期|195-200|共7页
作者
陈慧子; 郭萌萌; 赵娟娟; 岳东旭; 丁涛; 陈超; 徐林;
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作者单位

贵州省基因检测与治疗特色重点实验室;

遵义563000;

遵义医学院免疫学教研室暨贵州省生物治疗人才基地;

遵义563000;

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正文语种 chi
中图分类医学免疫学;
关键词
微小RNA-7; 基因敲减; 巨噬细胞; 炎症;

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